Microbiologia y virologia

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Pruebas bioquímicas: conjunto de tests utilizados para detectar alguna propiedad fisiológica o bioquímica de un microorganismo, constituyendo una herramienta muy importante para su clasificación.
Enzimas: proteínas altamente especializadas encargadas de catalizar reacciones químicas
Endoenzimas: enzimas intracelulares cuya función es catalizar reacciones, tanto de síntesis como de degradación.
Exoenzimas: enzimas extracelulares que son excretadas a través de la pared celular al medio ambiente, para catalizar reacciones de degradación de macromoléculas.
*Exoenzimas hidrolizantes: Descomonen o hidrolizan los hidratos de carbono en forma parcial o total. Agar nutritivo y se le agrega almidón al 1%. siembra en grilla incubar por 48 horas. Resultados halo incoloro alrededor del crecimiento indica la hidrólisis del almidón, y por lo tanto, el microorganismo es amilasa positivo. Si existe una coloración azul-parda alrededor del crecimiento significa que el almidón no ha sido hidrolizado por el microorganismo, debido a que no posee la enzima y por lo tanto es amilasa negativo.
*Enzimas proteolíticas: descomponen o hidrolizan proteínas naturales como la gelatina. agar nutritivo y se agrega gelatina al 1%. Siembra en grilla incuba por 48 horas. Resultados Una halo incoloro alrededor del crecimiento indica la hidrólisis de la gelatina, y por lo tanto el microorganismo es gelatinasa (+). Si existe formación de un precipitado blanco alrededor del crecimiento se considera negativo, ya que esto corresponde a la reacción de la gelatina con el reactivo de Frazier, lo que indica que el microorganismo no posee la enzima gelatinasa.
*Prueba con Agar Hierro Kliger: permite determinar la capacidad de un microorganismo de utilizar glucosa o lactosa. medio contiene lactosa al 1% y glucosa al 0,1% siembra en picadura y en estría Resultados fucsia sobre amarillo (glucosa), rompe agar (glucosa y forma gas), amarillo (glucosa, si se acaba lactosa), negro (acido, glucosa), sup. fucsia (peptonas). Incubar a 37ºC durante 24 hrs.
*IMVIC: corresponde a 4 pruebas que se utilizan para la identificación de Enterobacterias.
-Producción de Indol (I): permite determinar si la bacteria produce la enzima triptofanasa que hidroliza el triptofano produciendo indol, acido pirúvico y amoniaco. Incubar a 37ºC durante 48 hrs Con el asa de loop, siembra en grilla.
-Rojo metilo: fermentación acido mixta. Resultados Sup roja (fermentación acido mixta), amarillo (no), naranja (reacción retardada).Incubacion 37°C por 48 hrs. Siembra en grilla.
-Voges Proskauer (VP): fermentación butanodiolica Incubar a 37ºC durante 48 hrs resultados: Positivo:formación de anillo rojo en la superficie del medio producto de la reacción entre el diacetilo y la guanidina (presente en las peptonas del medio). El contacto con el oxígeno y la temperatura moderada favorecen la reacción. Negativo: formación de un anillo amarillo (color del reactivo) o cobrizo.
-Citrato (C): citrato como única fuente de carbono y energía. Incubar a 37ºC durante 48 hrs resultados: Positivo: el medio de cultivo se torna azul negativo: el medio de cultivo mantiene su color original (verde)
*Movilidad Indol Ornitina siembra en picadura, incubación 24 h, 35°C medio diferencial. Resultados móvil hay turbidez, morado posee ornitidina indol, amarillo rosado a rojo produce indol, amarillo incoloro no prod.
*Prueba de la oxidasa: Presencia de citocromo C , resutados. colonia color violeta, bac. Produce oxidasa.
*Prueba de la catalasa Presencia de enzima catalaza. Resultados formación de burbujas es positivo.
*Prueba de oxido - fermentación usa carbohidrato por via oxidasa o fermentativa siembra en picadura, resultados amarillo en tercio sup (aerobio estricto), mas abajo (anaerobio), amarillo completo (aerobio facultativo).
*Prueba del Agar McConkey si la bact utiliza lactosa o no. Medio selectivo resultados: rojas con presipitado (utilizan lactosa), incoloras(no).
*Prueba del Agar SS reconocen salmonella y shigela, resultados colonias rosadas (positivo), incoloras (no)

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