Fragmentación del adn

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FRAGMENTACIÓN DEL ADN: son enzimas capaces de romper el ADN. estas enzimas son denominadas endonucleasas de restricción, restrictasas o enzimas de restricción, son las capaces d reconocer y cortar por puntos cncretos en la secuencia de nucleótidos, k son las llamadas secuencias diana. UTILIZACIÓN DE UN VECTOR: es el encargado de introducir un determinado fragmento de ADN en otras células. PLÁSMIDOS: las bacterias poseen una molécula de ADN bicatenario circular en el k portan la mayoria de su información genética. pero ademas poseen unas pekeñas moléculas de ADN, tb bicatenarias y circulares, denominados plásmidos y de los k puede haber varios ejemplares en una misma bacteria.

UNIÓN DE UN FRAGMENTO DE ADN A UN VECTOR: ADN RECOMBINANTE: la técnica consiste en cortar el ADN pasajero, y el vector cn la misma enzima de restricción. INTRODUCCIÓN DE ADN EXTRAÑO: una vez obtenido el vector con el ADN extraño, hay k incorporarlo a una célula viva k lo ha de incorporar a su patrimonio genético. la técnica a emplear será diferente según el vector utilizado y el tipo de célula receptora. LA TRANSFORMACIÓN EN BACTERIAS se consigue alterando las condiciones del medio para aumentar la permeabilidad de la membrana al ADN. si el vector es un virus, él ya posee los mecanismos de introducción del ADN propio y extraño. cuando se utiliza el plásmido Ti con células vegetales, la propia bacteria tiene sus mecanismos para introducir el plásmido. TRANSFORMACIÓN es la introducción de ADN extra en bacterias, de forma natural o facilitada por vectores. Si se introduce en células eucariotas se emplea el término transfección. Si la inoculación del ADN extraño se realiza en las células reproductoras de animales o plantas, se denomina transgénesis, llamándose a estos organismos transgénicos.

CLONACIÓN DE ADN: se ha conseguido fragmentar todo el genoma de una especie (x ejemplo la humana) introducen los fragmentos en bacterias utilizando vectores como los plásmidos y consiguen clones de bacterias, k contienen cada uno de ellos un determinado fragmento de restricción. Por tanto tenemos clones de ADN. CLONACIÓN DE UN GEN: se localiza el clon k contiene el fragmento adecuado. luego se vuelve a fragmentar, y se localiza el pekeño fragmento k contiene el gen. la obtención de un clon de un determinado gen tiene una enorme importancia, sobre todo cuando lo k pretendemos es obtener una determinada proteína de interés cmo la insulina, a partir de bacterias k contienen y expresan dicho gen.

EXPRESIÓN DE LOS GENES INCORPORADOS: la posibilidad de introducir un gen en bacterias puede servir para clonar dicho gen. esto parece aún muxo + interesante la posibilidad de k ese gen se exprese y se origine el producto proteico correspondiente (tras los procesos de transcripción y traducción). 1- los genes eucariotas presentan intrones y los de las bacterias no. en lugar de introducir el fragmento de ADN humano original en la bacteria, lo k se ha hecho es lo siguiente sin la información de los intrones: - Aislar ARN-m propio de la insulina. - Sintetizar un ADN complementario x medio de la retrotranscriptasa inversa. - Este ADN al ser copia del ARN-m madura, carece de intrones. - El ADNc se introduce en un vector y se transforma a las bacterias. (ADN recombinante). 2- El ADN c Carece del promotor y otras secuencias de interés. El ADNc se obtiene del ARN-m x lo k carece de promotor y terminador, con lo cual no se produce la transcripción del gen dentro de las bacterias. aunk el ADN insertado tuviera esas regiones promotoras y terminadoras, no se servirían, pues k, dixas regiones son diferentes ntre bacterias y células eucariotas. la única solución ha sido cortar las secuencias promotoras de bacterias y unirlas al ADNc humano. SECUENCIACIÓN DEL ADN: saber el orden en el k se encuentran cada uno de los nucleótidos en el ADN.



PROTEINAS DE INTERÉS TERAPÉUTICO PRODUCIDAS X BACTERIAS: la insulina, hormona del crecimiento, interferón, el factor VIII de la coagulación y vacunas. TERAPIA GÉNICA: consiste en introducir el gen correcto en células de un ser vivo k tiene una mutación k le provoca una enfermedad. La terapia de las células somáticas se está llevando a cabo de 3 maneras diferentes: - terapia ex vivo: (fuera del cuerpo). se extraen células con genes defectuosos y se le introducen mediante vectores adecuados, copias del gen normal. estas células transfectadas se vuelven a implatar en el ser vivo. -terapia in situ: (en el mismo lugar). se introducen los vectores unidos a los genes correctores directamente en los tejidos donde se necesitan esos genes. sta técnica se stá ensayando para tratar la fibrosis quística, enfermedad genética x mutación de un sólo gen y k afecta a los pulmones dificultando seriamente la respiración. -terapia in vivo: ésta es la esperanza del futuro. consiste en inyectar en la sangre los vectores con el gen adecuado. 

aplicaciones de la ingeniería génica en la medicina: -DIAGNÓSTICO DE ENFERMEDADES GENÉTICAS. - MEDICINA FORENSE Y MEDICINA LEGAL. -DELITOS EN LOS K NO HAY TESTIGOS Y LA VÍCTIMA MUERE O NO PUEDE RECONOCER AL AGRESOR. APLICACIONES DE LA INGENIERÍA GÉNICA EN LA AGRICULTURA: PLANTAS TRANSGÉNICAS. las principales aplicaciones de la ingeniería genética en la agricultura se centran en la obtención de las llamadas plantas transgénicas. la introducción de stos genes extraños en células eucariotas es + cmplicado k en bacterias. algunos de los principales logros obtenidos son los siguientes: -obtención de distintas variedades transgénicas del maíz. obtención de variedades transgénicas del trigo + nutritivas y + resistentes a las plagas y a los herbicidas. obtención de una variedad de tomate k madura + lentamente.

APLICACIONES DE LA INGENIERÍA GENÉTICA EN LA PRODUCCIÓN ANIMAL: ANIMALES TRANSGÉNICOS: las principales aplicaciones de la ingeniería genética a la mejora de la producción animal se han realizado en peces. - Carpas transgénicas: crecen entre un 20 y un 46% + rapidamente gracias al gen de la hormona de crecimiento de la trucha arco iris. Salmones transgénicos: resisten mejor las bajas de temperaturas gracias a la incorporación de un gen de una especie k vive en el ártico. PROYECTO GENOMA HUMANO: el conocimiento de la secuencia normal de nucleótidos permitirá tener una referencia para la terapia génica. una vía de trabajo ha diso conocer en k orden están los genes y a k distancia entre ellos (mapa génico humano). otra via es descifrar la secuencia de nucleótidos (secuenciación) de cada gen. está secuenciado totalmente el 100%.  

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