Análisis de Manchas de Sangre: Técnicas Espectroscópicas y de Certeza

Análisis de Manchas de Sangre

Técnicas Espectroscópicas

Espectroscopia de Oxihemoglobina, Metahemoglobina y Cranometahemoglobina

Objetivo: Poner de manifiesto mediante espectros de absorción la presencia de hemoglobina y/o alguno de sus derivados en manchas de sangre.

Resultados:

• Positivo: Espectros máximos en 412, 540, 575 y 630 nm.
• Negativo: Sin espectros.

Hemoglobina:

• Luz visible: 540 y 575 nm.
• Luz violeta: 412 nm.

Método de Obtención del Espectro de la Oxihemoglobina

1. Fijar la mancha (fotográfica, planimetría y descripción).
2. Tomar la muestra con solución fisiológica y tela libre de apresto.
3. Extraer con agua destilada en un tubo de ensayo, dejar reposar y posteriormente filtrar.
4. Leer a 412, 450 y 570 nm.

Método de Obtención del Espectro de la Hematina (Hemoglobina Degradada)

1. Proceder como habitualmente lo hacen los criminalistas.
2. Extraer la mancha con hidróxido de sodio y unas gotas de pirimidina en un tubo de ensayo, dejar reposar y posteriormente filtrar.
3. Leer a 600 nm.

Método de Obtención del Espectro de la Metahemoglobina (Hemoglobina en Estado Férrico)

1. Procesar como se acostumbra.
2. Extraer la mancha con agua destilada y una solución de ferricianuro de potasio en un tubo de ensayo, dejar reposar y posteriormente filtrar.
3. Leer a 630 nm.

Método de Obtención del Espectro de la Cranometahemoglobina

1. Proceder como se acostumbra.
2. Extraer la mancha con agua destilada y una solución de ferricianuro de potasio en un tubo de ensayo, dejar reposar y posteriormente filtrar.
3. Realizar una lectura a 540 nm.

Técnicas de Certeza (Buscan Hemoglobina)

Técnica de Takayama

Tipo: Certeza

Método: Cualitativo

Objetivo: Detectar hemoglobina.

Reactivos: Hidróxido de sodio, glucosa, piridina, agua destilada.

Resultado Positivo: Cristales romboidales de color rosa observables al microscopio.

Técnica de Teichman

Tipo: Certeza

Método: Cualitativo

Objetivo: Detectar hemoglobina.

Reactivos: Cloruro de sodio + bromuro de potasio + ioduro de potasio + ácido acético.

Resultado Positivo: Cristales romboidales de color café observables al microscopio.

Determinación de Proteínas Humanas en Sangre Seca

Tipo: Específica

Método: Cualitativo

Objetivo: Detectar proteínas de la hemoglobina humana.

Reactivos: Anticuerpos, inmunocromatografía de capa delgada directa.

Resultado Positivo: 2 bandas en las tiras reactivas.

Determinación de Tipo Sanguíneo de Sangre Líquida

Tipo: Tipado

Método: Cualitativo

Objetivo: Determinar el grupo sanguíneo.

Reactivos: Anticuerpos (glucoforina).

Resultado Positivo: Aglutinación.

Determinación de Tipo Sanguíneo de Sangre Seca

Tipo: Tipado

Método: Cualitativo

Objetivo: Determinar el grupo sanguíneo.

Reactivos: Anticuerpos, absorción-elución.

Resultado Positivo: Aglutinación.

Determinación del Perfil Genético

Tipo: Individualización

Método: Cualitativo

Objetivo: Analizar microsatélites (STR, repeticiones cortas en tándem).

Reactivos: Enzimas de restricción, PCR, polinucleótidos, PowerPlex, estadísticas de poblaciones, comparaciones.

Resultado Positivo: Coincidencias entre las repeticiones de los alelos en la muestra dubitada y la indubitada.