Bioquímica de las Enzimas: Sistemas Multienzimáticos, Cofactores y Factores de Actividad

Sistemas Multienzimáticos

Los sistemas multienzimáticos son un complejo de varias enzimas diferentes que están ordenados de tal modo que el producto de la reacción catalizada por la primera enzima es recibido como sustrato por la segunda, y así sucesivamente.

Cofactores Enzimáticos

Los cofactores enzimáticos son sustancias no proteicas, termoestables, que pueden encontrarse fuerte o débilmente unidos a la enzima. La mayoría de las enzimas los requieren para su función. Se clasifican en:

• a) Coenzimas: son moléculas orgánicas relativamente pequeñas, no proteicas, termoestables y dializables.
• b) Activadores: pueden ser iones metálicos, mono y divalentes, como el Fe++, Mg++, Mn++, Zn++, etc.
• c) Grupo prostético: cuando se encuentra covalentemente unido a la enzima.

Apoenzima

Se denomina apoenzima a la enzima que se encuentra sin su coenzima.

Factores que Modifican la Actividad Enzimática

• Concentración de la enzima: En presencia de una cantidad saturante de sustrato, y manteniendo el pH y la temperatura constantes en el medio de reacción, se puede establecer una relación lineal entre la concentración de la enzima y la actividad enzimática. Es decir, que a medida que aumenta la concentración de la enzima, también aumenta su actividad.
• Concentración del sustrato.
• Temperatura: Si se mantienen constantes la concentración de enzima, el sustrato y el pH, en general, la velocidad de muchas reacciones biológicas prácticamente se duplica por cada 10 ºC de incremento de temperatura. La temperatura a la cual la actividad catalítica es máxima se llama temperatura óptima. Muy por encima de esta temperatura, se pierde la actividad catalítica debido a su desnaturalización. Para la gran mayoría de las enzimas, la temperatura óptima es de alrededor de 37 ºC.
• pH.

Trabajo Práctico

Objetivo

Estudiar el comportamiento enzimático de la enzima diastasa en la miel de abejas.

Fundamento del Método

El sustrato de almidón tamponado se incuba con la muestra y se produce la hidrólisis enzimática. Esta última se determina por el agregado del reactivo yodo, el cual produce coloración con el remanente del almidón no hidrolizado. La disminución del color que ocurre en los tubos del desconocido después de incubarlo, respecto del tubo control, es una medida de la actividad de diastasa de la muestra, que se expresa en unidades de diastasa (UD).