Brucella, Bordetella, Francisella y Neisseria: Microbiología Clínica, Patologías y Diagnóstico

Brucella

Brucella es un cocobacilo Gram negativo, catalasa y oxidasa positivo, con cápsula o sin ella, parásito intracelular y aerobio estricto que requiere atmósfera de CO2.

Especies

• B. melitensis (ovinos)
• B. abortus (vacas)
• B. suis (cerdos)

Medios de cultivo

Agar Tripticasa Soja y Agar Brucella.

Transmisión

• Directa: contacto con animales.
• Indirecta: alimentos.

B. melitensis

Causa brucelosis, también conocida como fiebre de Malta o fiebre ondulante.

Diagnóstico

Directo (inmunológico)

Suero: test de Rosa de Bengala, test de Coombs y aglutinaciones.

Indirecto (microbiológico)

Sangre: observación en fresco (la tinción de Gram no es útil), hemocultivo, coloración de Stamp y ZN modificada.

Método de Castañeda

Utiliza un medio líquido-sólido en el mismo frasco. El líquido permite el enriquecimiento de las Brucellas presentes en la sangre y el sólido sirve para las resiembras. El frasco se debe incubar a 35-37 ºC en posición vertical. A las 48 horas, si no se observa crecimiento, el frasco se inclina para que la fase líquida impregne el medio sólido y se incuba nuevamente en posición vertical.

Método Isolator

Sistema de lisis-centrifugación en el mismo tubo. La sangre inoculada se lisa por acción de detergentes, sustancias que destruyen las células y lisan las bacterias, y se somete a concentración por centrifugación. El sedimento se siembra en medio sólido.

Bordetella

Bordetella es un cocobacilo Gram negativo, aerobio estricto, que se encuentra en la mucosa respiratoria y es parásito del hombre y de los animales. Su vacuna es la DTP.

Medio de cultivo

Bordet-Gengou.

Especies

• B. pertussis y B. parapertussis: producen tos ferina; huésped el hombre.
• B. bronchiseptica: produce neumonía; huésped animal.

B. pertussis

Causa la tos ferina o coqueluche. Se transmite de persona a persona.

Tres fases

• Catarral: 1 a 2 semanas, similar a un resfriado.
• Paroxística: 3 a 4 semanas, con tos paroxística.
• Convalecencia: 6 a 8 semanas, la tos desaparece.

Diagnóstico

Muestra: nasofaringe y exudado bronquial → observación en fresco → IFD (inmunofluorescencia directa) → siembra en Bordet-Gengou (pequeñas gotas de mercurio, pequeña hemólisis) → Gram (cocos G-) → IFD.

Francisella tularensis

Francisella tularensis es un cocobacilo Gram negativo, aerobio estricto, con hábitat en animales, especialmente roedores y conejos. Es resistente al frío, a la congelación y a la lejía, y tiene un alto poder infectante.

Medios de cultivo

AS + cisteína, ACho + cisteína, BYCE y TM.

Patología

Tularemia o enfermedad de los conejos.

Transmisión

Contacto, carniceros, cuidadores, artrópodos, agua e inhalación.

Manifestaciones

• Llagas y heridas oculares
• Faringitis, vómitos y diarreas
• Tularemia tifoidea y neumonías

Diagnóstico

Serológico: no se realiza.

Microbiológico: inmunofluorescencia → siembra en AS + cisteína y ACho + cisteína → aglutinación y PCR.

Neisserias

Las Neisserias son cocos Gram negativos que forman granos de café, aerobios estrictos, catalasa y oxidasa positivos.

Medios de cultivo

• Común: AS y ACho.
• Selectivo: Thayer-Martin, TM modificado y NYC.

N. gonorrhoeae (gonococo)

Causa la gonorrea, una infección de transmisión sexual.

Síntomas

• Hombre: uretritis (supuración blanquecina) y prostatitis.
• Mujer: vaginitis, frecuentemente asintomática, y salpingitis.
• Recién nacido: ceguera gonocócica.

Diagnóstico

Muestra estéril: uretra o exudado vaginal → observación en fresco (granos de café, cocos G-, polimorfonucleares) → hisopo de rayón y medio de transporte Stuart → siembra en TM, TMM, NYC y ACho → Gram → oxidasa y catalasa positivas.

Para identificar el tipo de Neisseria se realiza la fermentación de azúcares. N. gonorrhoeae: GLU+, MAL-, SAC-.

N. meningitidis

Bacteria capsulada con 13 serotipos, el más importante es el serogrupo ABCZ.

Patología

Meningitis, artritis y faringitis. Fiebre y petequias. Afecta principalmente a niños menores de 4 años.

Diagnóstico

Muestras: LCR y hemocultivo → observación en fresco (cocos G- en diplococos) → siembra en ACho → oxidasa y catalasa positivas → fermentación de azúcares. N. meningitidis: GLU+, MAL+, SAC-.

Moraxella catarrhalis

Moraxella catarrhalis es un cocos Gram negativo en diplococos, oxidasa y catalasa positivo. Forma parte de la flora normal respiratoria de los niños.

Síntomas

Sinusitis y bronquitis. En inmunodeprimidos puede causar neumonías.

Medios de cultivo

AS y ACho. No crece en TM ni NYC.

Diagnóstico

Gram de la muestra respiratoria → siembra en ACho → oxidasa y catalasa positivas. Glucosa-, maltosa-, sacarosa-.

Haemophilus

Haemophilus son cocobacilos pleomórficos, catalasa y oxidasa positivos, que pueden ser capsulados y presentar hemólisis. Son anaerobios facultativos y requieren los factores de coagulación X y V.

Medios de cultivo

AS + factor de coagulación y ACho.

H. influenzae

Bacteria capsulada, la más importante del género. Requiere el factor X y V. Se transmite por vía aérea.

Patología

• Cepas capsuladas: patología grave, principalmente meningitis en niños menores de 5 años, además de artritis, epiglotitis y celulitis (tipo B en menores de 4 años y tipo C en mayores de 4 años).
• Cepas no capsuladas: patología más leve, como otitis, bronquitis y sinusitis.

Diagnóstico

Muestra: LCR → observación en fresco (cocos G- pleomórficos) → siembra en AS + factor de coagulación V y X, que ayuda a la identificación. El ACho no ayuda.

Satelitismo: una prueba positiva consiste en el crecimiento de pequeñas colonias de Haemophilus únicamente muy cerca de la estría de Staphylococcus aureus. Se debe realizar un frotis coloreado por Gram para confirmar la morfología.

Identificación: catalasa y oxidasa positivas, dependencia de los factores X y V, y hemólisis.

H. ducreyi

Cocobacilos Gram negativos que requieren el factor X. Causa el chancroide o chancro blando, una úlcera dolorosa e inflamable de la mucosa genital, con inflamación de ganglios linfáticos. Es una infección de transmisión sexual.

Diagnóstico

Por sintomatología. Con la tinción de Gram de la úlcera se observan cocobacilos G-, en un patrón de banco de peces.