Turgencia y plasmólisis en células vegetales: práctica con rojo neutro y extracción de ADN

Resumen

El documento explica las prácticas de tinción de la epidermis con rojo neutro y la extracción de ADN. Analiza cómo las diferencias de concentración entre el medio externo y el jugo vacuolar provocan turgencia o plasmólisis por ósmosis, y el papel del detergente, el NaCl, el zumo de piña o papaya y el etanol frío en la extracción de ADN.

Puntos clave

Al sumergir la epidermis en rojo neutro (medio hipotónico respecto al jugo vacuolar), el agua entra en la vacuola y aumenta su volumen, produciendo turgencia.
La disolución de NaCl al 6% es hipertónica respecto al jugo vacuolar, por lo que el agua sale y la vacuola se contrae: plasmólisis.
Los cambios observados en la vacuola se deben a fenómenos de ósmosis causados por las diferencias de concentración entre el medio externo y el jugo vacuolar.
El detergente rompe la pared celular, la membrana plasmática y la membrana nuclear, y emulsiona los lípidos de las membranas.
El NaCl evita la unión de las proteínas al ADN y, al atraer las cargas negativas del ADN, permite su dispersión.
El zumo de piña o papaya contiene proteasas (como la papaína) que eliminan proteínas y enzimas que degradarían el ADN.
El etanol frío se añade lentamente porque el ADN es soluble en agua pero no en alcohol, por lo que precipita en la interfase agua-alcohol.

Ponte a prueba

Ø¿A qué se debe la gran extensión de la Coloración de la célula tras la tinción con rojo neutro? Al sumergir la epidermis en la disolución de Rojo neutro (medio hipotónico en relación al jugo vacuolar), el agua con el colorante Pasa al interior de la vacuola provocando el aumento de su volumen, con lo que El tonoplasto (membrana que rodea la vacuola) queda adherida a la membrana Plasmática. El colorante se difunde por todo el contenido vacuolar, teñíéndolo En toda su extensión.

Ø¿Qué papel desempeñan las diferentes Concentraciones de las disoluciones de tampón fosfato y de cloruro sódico sobre La del jugo vacuolar? La Disolución formada por el rojo neutro y el tampón fosfato es hipotónica Respecto al interior de la vacuola. El tampón fosfato se encarga de ayudar la Entrada del colorante rojo neutro (hipotónico) al interior de la vacuola, Producíéndose un fenómeno de turgencia. La disolución de NaCl al 6% es Hipertónica en relación con el jugo vacuolar, por lo que el agua sale de la Vacuola que se contrae producíéndose el fenómeno de plasmólisis.

Ø¿A qué atribuye los cambios que se observan En la vacuola en cada caso? A Los fenómenos de turgencia y plasmólisis (ósmosis) debidos a las diferencias de Concentración entre las disoluciones del medio externo y el jugo vacuolar.

Ø¿Para Qué se utiliza el detergente y el NaCl en la extracción? El detergente se utiliza para romper o lisar La pared celular, la membrana plasmática y la membrana nuclear, para dejar Libre al ADN. Se utiliza detergente ya que emulsiona los lípidos de las Membranas celulares. El NaCl evita la uníón de las proteínas al ADN y solventa Las cargas negativas ya que los iones de NaCl son atraídas por las cargas Negativas del ADN permitiendo así su dispersión.

Ø¿Qué Componente aporta el zumo de piña/papaya y cuál es su utilidad? El zumo de piña/papaya contiene una enzima (proteasas) como la papaína que rompe las proteínas de la disolución y eliminan Las enzimas que rompen las cadenas del ADN. Esta etapa es importante para Mantener la estructura del ADN y además porque las proteínas intervienen en el Proceso de extracción de esta molécula, pudiendo llegar a contaminar la Muestra.

Ø¿Por Qué se incorpora el etanol frío al medio? La molécula de ADN es soluble coloidalmente en agua pero no en Alcohol por lo que precipita en la interfase agua alcohol. Para ello se añade Alcohol muy frio lentamente sobre la fase acuosa que contiene el ADN disuelto.

Preguntas frecuentes

¿Por qué se tiñe toda la vacuola con rojo neutro?

Porque la disolución de rojo neutro es hipotónica respecto al jugo vacuolar, el agua entra en la vacuola y arrastra el colorante, que se difunde por todo su contenido.

¿Qué diferencia hay entre turgencia y plasmólisis?

La turgencia es el aumento de volumen de la vacuola por entrada de agua en un medio hipotónico. La plasmólisis es la contracción de la vacuola por salida de agua en un medio hipertónico, como la disolución de NaCl al 6%.

¿Para qué sirve el etanol frío en la extracción de ADN?

El ADN no es soluble en alcohol, así que al añadir alcohol frío lentamente sobre la fase acuosa, el ADN precipita en la interfase agua-alcohol y puede separarse.