Detección Serológica de Brucelosis: Protocolo de la Prueba Rápida Rosa de Bengala (RBPT)

Prueba de Rosa de Bengala (RBPT)

Fundamento

Prueba de aglutinación rápida en placa para la detección temprana de aglutininas específicas de Brucella (especies Brucella melitensis, abortus y suis).

Material Necesario

• Pipeta Pasteur.
• Placa de titulación para incubar.
• Placa de prueba o “Tarjeta blanca”.
• Palillos homogeneizadores.
• Estufa de cultivos.

Reactivos

El kit incluye:

• Antígeno Rosa de Bengala.
• Control Positivo de Brucella.
• Control Negativo de Brucella.
• Suero fisiológico (Solución salina).

Muestra

• Suero sanguíneo (corrección de 'suero láctico' a la muestra biológica correcta para serología).

Técnica de la Prueba Rápida en Placa (RBPT)

1. Llevar la muestra de suero a temperatura ambiente.
2. En el primer círculo de la placa de prueba, se deposita una gota de reactivo Rosa de Bengala y una gota de control positivo, asegurando que no se toquen inicialmente.
3. En el segundo círculo de la placa de prueba, se deposita una gota de reactivo Rosa de Bengala y una gota de suero problema (muestra), asegurando que no se toquen.
4. En el tercer círculo de la placa de prueba, se deposita una gota de reactivo Rosa de Bengala y una gota de control negativo, asegurando que no se toquen.
5. Con los palillos, se homogeneiza la muestra, utilizando un palillo distinto para cada círculo de la tarjeta.
6. Se deja reposar unos minutos y se observa si hay aglutinación.

Fase de Titulación y Confirmación (Coombs)

Los siguientes pasos describen la técnica de titulación o la detección de anticuerpos bloqueantes, que complementan la prueba rápida:

7. En la placa de titulación, se deposita 1 gota de control negativo y 1 gota de la muestra.
8. Se incuba a 37 °C en la estufa de cultivo.
9. La primera fase de Coombs consiste en la incubación para ver si hay aglutininas incompletas. Si la aglutinación es incompleta, no se aprecia bien la reacción.
10. Si el resultado es negativo en esta fase, se añade suero de Coombs para comprobar que no se hayan unido anticuerpos a las IgG (detección de anticuerpos bloqueantes).

Lectura e Interpretación de Resultados

• No Aglutinación: Suero Negativo.
• Cualquier cantidad de Aglutinación: Presencia de anticuerpos específicos. Suero Positivo.

Esta es solo una prueba cualitativa de screening. Si resulta positiva, debe ser confirmada mediante otra prueba cuantitativa para brucelosis (ej. seroaglutinación estándar o ELISA).

Resultados Obtenidos

SUERO NEGATIVO

Nota Metodológica

Solamente se realizó el método cualitativo (Prueba Rápida en Placa).

Observaciones Clínicas

Esta prueba es de gran ayuda para diferenciar y verificar el diagnóstico de Brucella abortus dentro del contexto de las reacciones febriles, reafirmando el diagnóstico para poder iniciar un tratamiento específico para Brucelosis.