Determinación de Grupos Sanguíneos: Fundamentos y Metodología de los Sistemas ABO y Rh

Pruebas de Compatibilidad Sanguínea

Introducción a la Tipificación Sanguínea

Las pruebas de compatibilidad son esenciales en la medicina transfusional para garantizar la seguridad del paciente. Estas pruebas se basan principalmente en la identificación de los sistemas antigénicos más relevantes presentes en la superficie de los glóbulos rojos: el sistema ABO y el sistema Rh.

El Sistema ABO

El sistema ABO es un método fundamental para determinar el tipo específico de sangre de un individuo. La tipificación depende de la presencia o ausencia de ciertas proteínas, denominadas antígenos, en la superficie de los glóbulos rojos (eritrocitos).

Los antígenos del sistema ABO son carbohidratos (azúcares). Según su composición, la sangre se clasifica en cuatro tipos principales:

• Tipo A: Posee el antígeno A.
• Tipo B: Posee el antígeno B.
• Tipo AB: Posee ambos antígenos (A y B).
• Tipo O: No posee ninguno de los antígenos (A o B) en la superficie del hematíe.

Características Inmunológicas del Sistema ABO

La presencia de antígenos en los eritrocitos se correlaciona con la presencia de anticuerpos naturales en el plasma, lo que determina la compatibilidad transfusional:

• Las personas con sangre de Tipo A expresan antígenos de tipo A en la superficie de sus glóbulos rojos y poseen anticuerpos anti-B en el plasma.
• Las personas con sangre de Tipo B expresan antígenos de tipo B en la superficie de sus glóbulos rojos y poseen anticuerpos anti-A en el plasma.
• Las personas con sangre de Tipo O no tienen los antígenos A ni B en la superficie de sus glóbulos rojos, pero tienen anticuerpos contra ambos tipos (anti-A y anti-B).
• Las personas con sangre de Tipo AB expresan ambos antígenos (A y B) en su superficie y no fabrican ninguno de los dos anticuerpos.

A causa de estas combinaciones, el Tipo O es considerado el donante universal (puede transfundir a cualquier persona con cualquier tipo ABO), y el Tipo AB es el receptor universal (puede recibir de cualquier tipo ABO).

Nota Histórica

Esta clasificación internacional, establecida por Landsteiner, reemplazó a la de Moss, en la cual el grupo I correspondía al grupo AB, el grupo II al grupo A, el grupo III al grupo B, y el grupo IV al grupo O. Es importante notar que la denominación «O» y «cero» es confusa, y ambas están muy extendidas en la práctica clínica.

El Sistema Rh (Rhesus)

En el año 1940, se detectó la existencia de un nuevo antígeno en la membrana de los hematíes. Este antígeno es crucial para la compatibilidad transfusional y se denomina Rh o antígeno D, ya que las primeras investigaciones se llevaron a cabo experimentando con simios del tipo Macacus Rhesus.

El factor Rh es otra proteína que, si está presente en la superficie del glóbulo rojo, clasifica la sangre como Rh positivo (Rh+). Si está ausente, se clasifica como Rh negativo (Rh-).

Sistemas de Tipificación Primarios

Los dos sistemas más importantes para la compatibilidad son:

• Sistema ABO
• Sistema Rh (Rhesus)

Compatibilidad Sanguínea

Metodología de Laboratorio: Tipificación Directa

A continuación, se describe el procedimiento para la determinación del grupo sanguíneo mediante el método directo, utilizando antisueros específicos para detectar los antígenos presentes en los eritrocitos.

Procedimiento del Método Directo

1. Centrifugación de Muestras: Centrifugar los tubos Vacutainer con muestra sanguínea anticoagulada con EDTA y el tubo Vacutainer sin anticoagulante, a una velocidad de 2500 rpm por 10 minutos. Esto es necesario para separar el plasma de los eritrocitos, ya que ambos se utilizarán por separado.
2. Rotulación de Tubos: Rotular los tubos de ensayo de la siguiente manera: en cada tubo se debe indicar el número de la muestra (ej. 1, 2, 3, 4) y el tipo de antisuero que se añadirá (Anti-A, Anti-AB, Anti-B o Anti-D). Ejemplo: 1,13, Anti-A; 1,13, Anti-AB, etc. El procedimiento se repite para las muestras restantes.
3. Preparación de la Dilución de Eritrocitos: En cuatro tubos limpios, preparar una dilución de eritrocitos al 2-5% con agua destilada, utilizando células de cada muestra. La dilución debe tomar un color rojo pálido.
4. Adición de Reactivos: Colocar en cada tubo rotulado una gota de la dilución de eritrocitos preparada y una gota del antisuero correspondiente.
5. Centrifugación Rápida: Llevar los tubos a la centrífuga y centrifugar por solo 15 segundos a una velocidad de 1000 rpm. Esto permite observar mejor la reacción antígeno-anticuerpo (formación de un botón o aglutinación).
6. Lectura e Interpretación: Leer los tubos, observando si hubo reacción (aglutinación) o no. Los datos obtenidos deben correlacionarse con el método inverso (tipificación plasmática) para confirmar la determinación del grupo sanguíneo completo (ABO y Rh).