Dinámica de Crecimiento Microbiano y Técnicas de Identificación de Patógenos

Dinámica del Crecimiento Microbiano

El crecimiento de los microorganismos en un cultivo sigue un patrón característico dividido en fases:

• Fase de latencia: Es el tiempo que tarda un cultivo nuevo en comenzar su crecimiento. Los microorganismos necesitan un periodo de adaptación durante el cual no aumenta la población.
• Fase exponencial: Es la fase en la que la población aumenta muy rápidamente, ya que no existe ningún factor que limite su crecimiento; la temperatura, la cantidad de oxígeno y el pH son los óptimos.
• Fase estacionaria: No hay crecimiento neto de la población: la cantidad de células nuevas que se forman y la de muertes están en equilibrio. Si no se añaden nutrientes nuevos, llegará el momento en que alguno se agotará, lo que hará que el crecimiento de la población sea más lento. Además, los productos de desecho se van acumulando y alguno puede llegar a ser tóxico, o puede variar la cantidad de oxígeno o el pH hasta llegar a un momento en que la fase de crecimiento exponencial termina.

4.2. Métodos serológicos

Se basan en la identificación de determinados componentes del agente patógeno (antígeno) mediante el uso de anticuerpos específicos para su detección:

• El ensayo ELISA: Se realiza en pocillos de plástico en los que se fija el anticuerpo de captura, al que se unirá el microbio si está presente. Después se añade un revelador, que es otro anticuerpo que se une al microbio capturado, pero con una enzima que causa un cambio de color en el medio.
• Tiras de flujo lateral: Son una variante del ensayo ELISA en la que los anticuerpos se disponen en tiras de nitrocelulosa por las que el líquido, en el que puede estar el microbio, avanza por capilaridad.

4.3. Métodos genéticos

Realizan la identificación de secuencias genómicas del microbio. La mayoría requiere un conocimiento previo del genoma de dichos microorganismos. Destacan:

• Hibridación: Consiste en la detección del ADN o ARN del patógeno utilizando sondas, secuencias cortas de ADN o ARN complementarias a las secuencias diana del microorganismo.
• PCR (Reacción en cadena de la polimerasa): Es la amplificación específica de ADN o ARN del microorganismo patógeno a partir de cebadores específicos.
• Secuenciación: Consiste en determinar la secuencia genética de parte del genoma del patógeno. La secuenciación masiva permite conocer la secuencia de todos los microorganismos presentes en una muestra, incluso sin conocimiento previo de su genoma.