Fundamentos y Aplicaciones de las Pruebas de Oxidasa y O/F Glucosa en Microbiología

Fundamentos Bioquímicos para la Identificación Bacteriana

Prueba de Oxidasa

Fundamento y Objetivo

Fundamento: La prueba de oxidasa se basa en la detección de la enzima citocromo oxidasa. Esta enzima participa en la cadena respiratoria aeróbica y cataliza la transferencia de electrones desde el citocromo c hasta el oxígeno molecular, formando agua. La presencia de la enzima se evidencia porque oxida el sustrato en presencia de oxígeno, formando un color púrpura oscuro.

Objetivo: El objetivo principal de la prueba de oxidasa es diferenciar las bacterias aerobias estrictas y algunas anaerobias facultativas que poseen la enzima citocromo oxidasa (oxidasa positivas) de aquellas que carecen de ella (oxidasa negativas).

Prueba O/F Glucosa (Oxidación/Fermentación de Glucosa)

Fundamento

La prueba O/F se basa en el principio de que las bacterias pueden metabolizar la glucosa mediante dos vías principales: oxidación y fermentación.

1. Oxidación: Las bacterias aerobias estrictas y algunas anaerobias facultativas oxidan completamente la glucosa a dióxido de carbono y agua mediante la respiración aeróbica, utilizando oxígeno molecular como aceptor final de electrones. (Este proceso forma ácido carbónico que disminuye el pH).
2. Fermentación: Las bacterias anaerobias estrictas y algunas anaerobias facultativas fermentan la glucosa en ausencia de oxígeno, produciendo ácidos orgánicos y otros compuestos como subproductos.

Objetivo

Determinar si una bacteria es capaz de oxidar o fermentar la glucosa, lo que proporciona información crucial sobre su metabolismo y su capacidad para crecer en presencia o ausencia de oxígeno.

Interpretación de Resultados O/F

• +/-: Oxida, pero no fermenta.
• -/+: Fermenta, pero no oxida.
• -/-: Inerte a los azúcares.

Diferenciación Clave: Enterobacterias vs. Bacilos No Fermentadores

La combinación de las pruebas de Oxidasa y O/F Glucosa es fundamental para distinguir estos dos grupos bacterianos:

• Metabolismo de la Glucosa:
  • Enterobacterias: Son fermentadoras de la glucosa, produciendo ácidos y gases a partir de la fermentación de carbohidratos.
  • Bacilos No Fermentadores: No fermentan la glucosa; obtienen su energía principalmente a través de la respiración aeróbica.
• Prueba de Oxidasa:
  • Enterobacterias: Generalmente son oxidasa negativas, ya que carecen de la enzima citocromo oxidasa.
  • Bacilos No Fermentadores: Generalmente son oxidasa positivos, ya que poseen la enzima citocromo oxidasa.
• Requerimientos de Oxígeno:
  • Enterobacterias: Son anaerobias facultativas; pueden crecer tanto en presencia como en ausencia de oxígeno.
  • Bacilos No Fermentadores: La mayoría son aerobios estrictos; requieren oxígeno para su crecimiento y metabolismo.