Fundamentos de Tinción Celular: Giemsa y Hematoxilina-Eosina

Tinción de Giemsa: Composición y Propiedades

La tinción de Giemsa emplea como colorante fundamental una mezcla de:

• Derivados tiacínicos catiónicos: Incluyen azur A, azur B y azul de metileno (derivados de iminas quinónicas). Están destinados a teñir los núcleos celulares.
• Eosina: Un colorante citoplasmático de carácter aniónico.

Propiedades del Reactivo Giemsa

El colorante Giemsa es soluble en alcohol metílico. En disolución, los componentes electropositivos y electronegativos se combinan para formar eosinatos de azur A, azur B y de azul de metileno.

La estabilización final del reactivo se consigue añadiendo glicerina. La glicerina aumenta la solubilidad del colorante en el alcohol y facilita su posterior mezcla con agua durante el proceso de coloración.

La técnica de Giemsa utiliza una combinación de colorantes neutros: tintes básicos como el azul de metileno, azur A y azur B, junto con un tinte ácido como la eosina. Esta mezcla proporciona una amplia gama de colores en la tinción.

Afinidad Tintorial Celular (Ejemplos Generales)

Componentes Basófilos

Se tiñen con colorantes básicos (como los componentes azules de Giemsa o la hematoxilina). Incluyen los ácidos nucleicos (ADN y ARN) que conforman el núcleo y el nucléolo, así como los ribosomas (libres o asociados al Retículo Endoplasmático Rugoso - RER).

Componentes Acidófilos

Se tiñen con colorantes ácidos (como la eosina). Incluyen muchas proteínas citosólicas o de exportación y mitocondrias (especialmente aquellas con alta concentración proteica).

Componentes Neutros o Negativos a Tinción

Generalmente no se tiñen o lo hacen débilmente con tinciones acuosas estándar. Incluyen lípidos, hidratos de carbono (H de C) y agua (H₂O). El Aparato de Golgi (Ap. de Golgi), donde ocurre la glicosilación de proteínas de exportación, también puede mostrar esta característica.

Tinción con Hematoxilina y Eosina (H&E) en Patología

Necesidad de la Tinción

¿Por qué los patólogos y patólogas usan hematoxilina y eosina (H&E)? Cuando se preparan muestras de tejido para examen microscópico, los cortes son tan finos que resultan casi invisibles sin tinción.

Conceptos Clave: Metacromasia y Ortocromasia

• Metacromasia: Ocurre cuando un colorante, al unirse a componentes celulares específicos (como los gránulos de mastocitos con Giemsa), imparte un color diferente al que posee en solución. Esto se debe a cambios en las propiedades de absorción de la luz del colorante por la disposición molecular del sustrato.
• Ortocromasia: Se produce cuando el colorante unido al tejido (T.) mantiene el mismo color que tenía en solución. Es el comportamiento más habitual.

Características y Uso de la Tinción H&E

La técnica con hematoxilina-eosina es la más utilizada rutinariamente en los laboratorios de anatomía patológica por varias razones:

• Posee un gran poder de resolución para la morfología general.
• Es económica y, por lo tanto, eficiente.
• Su realización es relativamente sencilla y rápida.

Componentes de la Tinción H&E

• Eosina: Es un colorante ácido con carga eléctrica negativa (aniónico). Se le considera un colorante citoplasmático, ya que tiñe estructuras con carga positiva, como muchas proteínas del citoplasma. Las estructuras que atraen colorantes ácidos se denominan acidófilas (se tiñen de rosa/rojo).
• Hematoxilina: Es un colorante básico (tras un proceso de oxidación y mordentado) con carga eléctrica neta positiva (catiónico). Se le considera un colorante nuclear debido a su afinidad por los ácidos nucleicos (ADN y ARN), que tienen carga negativa. Las estructuras que atraen colorantes básicos se denominan basófilas (se tiñen de azul/púrpura).

Importancia Clínica de la Tinción H&E

Para que el patólogo o patóloga pueda visualizar adecuadamente el tejido, este debe ser teñido. La combinación de hematoxilina (nuclear) y eosina (citoplasmática/extracelular) permite diferenciar distintos tipos de células y estructuras intracelulares y extracelulares.

Las células anormales (por ejemplo, cancerosas) suelen presentar un aspecto diferente al de las células normales (en tamaño nuclear, relación núcleo/citoplasma, hipercromasia, etc.) tras la tinción con H&E, lo que convierte a esta técnica en una herramienta fundamental y poderosa para el diagnóstico diario en patología.