Métodos Analíticos de Unión Antígeno-Anticuerpo y Técnicas de Partición
Clasificado en Plástica y Educación Artística
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Principales métodos analíticos basados en la unión Ag-Ac
Métodos de detección
- Técnica de precipitación: Incluye la técnica de precipitación propiamente dicha, difusión radial de Ouchterlony, inmunoelectroforesis y difusión radial simple de Mancini.
- Técnica de aglutinación: Técnicas de inmunoaglutinación (hemaglutinación directa e indirecta, técnicas con látex, entre otras).
- Técnica de inmunofluorescencia: Técnicas inmunofluorimétricas y citometría de flujo.
- Técnica de inmunoensayo: Técnicas inmunorradiológicas (radioinmunoensayo RIA y ensayo inmunorradiométrico IRMA) y técnicas inmunoenzimáticas (ELISA, EIA).
Diferentes métodos para realizar la partición
- Adsorción del antígeno libre: Carbón activo, carbón revestido de dextrano, silicatos (talco, florisil) y resinas de intercambio iónico.
- Precipitación inespecífica del complejo Ag-Ac: Sales inorgánicas (SO₄NH₄, SO₄Na₂) y polietilenglicol (PEG).
- Precipitación específica del complejo Ag-Ac: Método del doble anticuerpo y método de la proteína A.
- Separación en fase sólida: Tubos recubiertos y bolas recubiertas.
Representación gráfica de resultados
| A: GRÁFICA DIRECTA | B: GRÁFICA SEMILOGARÍTMICA | C: GRÁFICA LOGARÍTMICA |
Eje X: Concentración de Ag Eje Y: %Ac = Ag* Forma: Curva decreciente. Nota: Si se aplica logaritmo, se convierte en una gráfica logarítmica (C). | Eje X: Log Concentración de Ag Eje Y: Log %Ac = Ag* Forma: Curva decreciente sigmoidea o asintótica. Importante: Es ilógico mantener dos logaritmos en una gráfica semilogarítmica; se debe eliminar uno. | Eje X: Log Concentración de Ag Eje Y: Log %Ac = Ag* Forma: Curva lineal decreciente. |
| Nota: Las gráficas A y B deben mantener ejes comparables. | ||
Análisis de curvas patrón: RIA e IRMA
Eje X: Concentración de Ag | Eje Y: %Ac = Ag*
- IRMA: Línea amarilla.
- RIA: Línea roja.
Estas gráficas representan una curva patrón directa. Son complementarias: cuando la señal de IRMA aumenta, la de RIA desciende. Estas curvas permiten medir la concentración de una muestra, determinar la relación entre Ag y Ac, y verificar la presencia de errores experimentales.