Muestreo de superficies y líquidos para detección de contaminación microbiológica

Muestreo de superficie

Muestreo de superficie. Se utiliza para localizar focos de contaminación de AB (agentes biológicos), permitiendo la identificación de reservorios. Hay dos técnicas principales: técnica de contacto y lavado directo.

Técnica de contacto

Se emplea cuando lo que se pretende es transferir la muestra de la superficie a un medio adecuado para su posterior identificación o cuantificación. Entre las técnicas de contacto se encuentran:

Placas de contacto

Descripción: Son placas de Petri con el medio de cultivo expuesto. El diseño permite que el medio contacte la superficie muestreada (superficie típica: 25 cm²).

Procedimiento:

• Apoyar la placa sobre la superficie sin arrastrar.
• Trasladar la placa al laboratorio y proceder a la incubación según el medio utilizado.

Observación: Se estima que solo 0,1 % de los microorganismos presentes en la superficie se transfieren a la placa. Es un método sencillo y económico.

Cintas adhesivas

Descripción: Cintas con material adhesivo que capturan microorganismos adheridos a la superficie.

Procedimiento:

• Aplicar la cinta sobre la zona a muestrear y retirarla.
• Realizar un método de tinción adecuado y observar en el microscopio.

Uso: Permite un análisis cualitativo de los microorganismos presentes.

Laminocultivos

Descripción: Dispositivos formados por un envase y una lámina con 2 o 3 caras recubiertas por medios de cultivo distintos, que permiten muestrear una misma superficie con varios tipos de cultivo. También pueden emplearse para líquidos.

Procedimiento:

• Desenroscar el tapón del laminocultivo.
• Apoyar la lámina sobre la superficie y enroscar el tapón nuevamente.
• Incubar según las instrucciones del fabricante.
• Seguir las indicaciones del fabricante para tiempos y temperaturas de incubación.

Frotis de superficie

Descripción: Se utilizan hisopos (varillas con algodón) o gasas estériles humedecidas en una solución de agua con peptona.

Procedimiento:

• Pasar la varilla o gasa por la superficie girándola para maximizar el contacto.
• Transportar la muestra al laboratorio en condiciones adecuadas.
• Sembrar en varias placas de cultivo y registrar los resultados.

Uso: Adecuado para estudios cualitativos de la flora presente.

Lavado directo

Descripción: Consiste en lavar la superficie con agua destilada u otros medios y recoger el líquido resultante.

Procedimiento:

• Aplicar el líquido de lavado sobre la superficie a muestrear.
• Recoger el fluido en un recipiente estéril.
• Sembrar una alícuota del líquido recogido para determinar la carga biológica.

Muestreo de líquidos

Muestreo de líquidos. Se recoge una muestra de un líquido para su posterior estudio en el laboratorio. Siempre se utilizan recipientes estériles y se sigue un procedimiento que minimice la contaminación y preserve la muestra.

Procedimiento general

• Preparación: Utilizar recipientes estériles cerrados.
• Desprecintado: Desprecintar el envase estéril en el lugar de muestreo.
• Enjuague: Lavar o enjuagar el envase tres veces con el mismo líquido que se va a muestrear, si procede.
• Toma de muestra: Tomar la muestra con un volumen acorde al procedimiento o ensayo a realizar.
• Cierre y conservación: Cerrar inmediatamente el recipiente y refrigerarlo (no "meterlo a la nevera" sin control de temperatura) hasta su procesamiento.

Recomendación: Etiquetar correctamente la muestra con fecha, hora, lugar de muestreo y responsable del muestreo. Seguir las indicaciones específicas del ensayo microbiológico previsto respecto al volumen, temperatura y tiempos máximos entre toma y procesamiento.