Pruebas bioquímicas IMViC y de identificación bacteriana: preguntas y respuestas

Resumen

El documento responde preguntas de examen sobre el reconocimiento de cultivos bacterianos: aspectos macroscópicos y microscópicos, y la finalidad de las pruebas de identificación bioquímica. Explica la prueba de la oxidasa y la catalasa y describe cada una de las pruebas del IMViC (indol, rojo de metilo, Voges-Proskauer y citrato), con su fundamento y la forma de leer sus resultados.

Puntos clave

El examen macroscópico de una colonia observa su forma, color y consistencia; el microscópico, su morfología, agrupación y tinciones diferenciales.
Las pruebas de identificación bioquímica demuestran actividades enzimáticas del metabolismo bacteriano poniendo la bacteria en contacto con un sustrato.
La prueba de la oxidasa detecta una enzima de la cadena de transporte de electrones; la de la catalasa comprueba la presencia de la enzima catalasa.
La prueba del indol detecta la producción de indol a partir de triptófano con el reactivo de Ehrlich o Kovacs y es típica de E. coli.
El rojo de metilo indica la producción de ácidos como producto final estable de la fermentación ácida mixta de azúcares.
La prueba de Voges-Proskauer detecta la fermentación butilenglicólica: la acetoína se transforma en diacetilo, con color rojo-fucsia si es positiva.
La prueba del citrato identifica enterobacterias que usan el citrato como única fuente de carbono, mediante un viraje de color.

Ponte a prueba

23. Nombra tres aspectos que vemos en el examen Macroscópico. La forma de las colonias. El color. La Consistencia.24. Nombra tres aspectos fundamentales en el Examen microscópico. La morfología. La agrupación.Las tinciones Diferenciales.25. ¿Para qué sirven las pruebas de Identificación bioquímica?Estas pruebas sirven para demostrar ciertas Carácterísticas bioquímicas del metabolismo bacteriano, como la presencia de Una enzima, un grupo de enzimas o una determinada actividad enzimática, lo que Se evidencia poniendo en contacto la bacteria con un sustrato determinado y Observando su respuesta al transformar o no el sustrato 27. ¿Qué determina la prueba de la oxidasa? ¿Y la de la catalasa?Es un enzima de la Cadena de transporte de electrones del metabolismo respiratorio de algunas Bacterias.Se emplea para comprobar la existencia de la enzima << Catalasa>> en el microorganismo estudiado.28. Nombra de forma breve cada Una de las pruebas que componen la prueba del IMViC. Explica que Detecta cada una de ellas.Prueba del Indol que detecta la Producción de indol a partir de triptófano. Utiliza el reactivo de Ehrlich o Kovacs (a base de paradimetilaminobenzaldehído), que se añade al medio líquido Y da un anillo de color rojo con el Indol. Es típica de E. Coli. El resultado Se lee tras 24 horas de la incubación, si es positive, se informa, pero si es Negativa se incuba otras 24 horas y se informa. La segunda prueba IMViC es la del Rojo de metilo. Permite Establecer la capacidad de un microorganismo para producir ácido como producto Final estable de la fermentación ácida mixta de azucares.La reacción de Voges-Proskauer (VP) es la tercera de las técnicas que componen la prueba IMViC. Se utiliza Para poner de manifiesto la fermentación butilenglicólica, mediante la cual Algunas bacterias metabolizan el ácido pirúvico (procedente de la degradación De glucosa) a acetoína (acetilmetilcarbinol). Al añadir el reactivo VP (alfanaftol y creatina en medio alcalina) al medio de cultivo, la acetoína Formada previamente se convierte en diacetilo, de color rojo carácterístico. La Aparición de un color rojo-fucsia en el medio indica la presencia de diacetilo. La prueba es negative si el medio de torna amarillento al añadir los reactivos.La Prueba del citrato es la cuarta prueba del IMVIC. Se usa para diferenciar especies De enterobacterias capaces de utilizar el citrato como única fuente de carbono. El fundamento de la prueba es poner de manifiesto mediante un viraje de color, La presencia y desarrollo de microorganismos en un medio que contenga citrato Como fuente de carbono.

Preguntas frecuentes

¿Qué determina la prueba de la catalasa?

Comprueba la existencia de la enzima catalasa en el microorganismo estudiado. Se usa para identificar bacterias concretas dentro de la identificación bioquímica.

¿Qué detecta la prueba del indol y en qué bacteria es típica?

Detecta la producción de indol a partir de triptófano. Se añade reactivo de Ehrlich o Kovacs, que da un anillo rojo si es positiva, y es típica de E. coli.

¿Cuándo se lee el resultado de la prueba del indol?

Se lee tras 24 horas de incubación. Si es positiva se informa; si es negativa se incuba otras 24 horas antes de informar.

¿Qué indica un resultado positivo de la prueba de Voges-Proskauer?

Indica la presencia de diacetilo, que da un color rojo-fucsia tras añadir el reactivo VP. Es negativa si el medio se vuelve amarillento.