Técnicas de Diagnóstico de Alergias: IgE Total e IgE Específica

Técnicas para el Diagnóstico de Alergias

1. Determinación de IgE Total

Existen diferentes métodos para determinar la IgE total:

1. Radioinmunoensayos
2. Enzimoinmunoensayos
3. InmunoCAP: Es la técnica de elección para la determinación de IgE total. Es un método comercial que utiliza anticuerpos anti-IgE unidos de forma covalente a una fase sólida.

Procedimiento básico del InmunoCAP:

• Se añade el suero o plasma del paciente (recogido con EDTA o heparina) al preparado comercial. Las IgE totales presentes en la muestra serán capturadas por los anticuerpos anti-IgE.
• Se realiza un lavado y seguidamente se añaden anticuerpos anti-IgE marcados con enzimas.
• Se incuba y se lava para eliminar la anti-IgE marcada no unida.
• Se incuba el sustrato.
• Se detiene la reacción.
• Se mide la fluorescencia.

2. Determinación de IgE Específica

Existen dos tipos principales de pruebas para determinar la IgE específica:

2.1. Pruebas in vitro

Estas pruebas utilizan alérgenos unidos a soportes sólidos a los que se unen los anticuerpos específicos del paciente. Posteriormente, se añade un anticuerpo marcado (con radioisótopos, enzimas o fluorocromos) dirigido contra la IgE. Actualmente, la determinación de IgE específica se suele llevar a cabo mediante la técnica comercial FEIA, considerándose positivos los valores > 0,7 KU/L.

Variantes:

• InmunoCAP Specific IgE: Una variante más sencilla.
• InmunoCAP ISAC: Consiste en un microchip en cuya superficie están fijados 103 componentes moleculares. Se añade el suero del paciente, fijándose las IgE presentes a los componentes. Se utilizan cantidades muy pequeñas de alérgeno y de suero. Se obtiene un resultado en menos de 10 minutos. Esta técnica consigue diferenciar la sensibilización frente a distintas proteínas recombinantes o naturales purificadas, que pueden estar presentes en alimentos vegetales, pólenes, ácaros, marisco, aves, huevo…

2.2. Pruebas in vivo: Pruebas en la piel

Estas pruebas reproducen la reacción de hipersensibilidad en la piel del paciente para demostrar que una persona está sensibilizada a una sustancia determinada.

Prick test o test por punción:

• Se marcan en el antebrazo las zonas donde se aplicará cada extracto alergénico.
• Se deposita cada extracto en su correspondiente zona.
• Se hace una ligera punción en la piel a través de la gota del extracto.
• Se deja actuar durante 20 minutos.
• Se examina si se produce alguna reacción sobre la piel (positiva: pápula > 7 mm² o diámetro > 3 mm).

Prick-Prick:

• Se aplica el alimento a testar en la cara anterior del antebrazo. Luego se realiza una ligera punción con una lanceta de punta corta a través del alimento y la epidermis.
• Otra opción es puncionar la lanceta en el alimento, sin ponerlo en el antebrazo, y efectuar la punción con la misma lanceta en la epidermis.
• La respuesta se inicia en pocos minutos, con un máximo de 15 minutos.
• La lectura se realiza después de 15 minutos, midiendo el tamaño del habón.