Técnicas de Electroforesis: Principios y Aplicaciones
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Tipos de Electroforesis
Electroforesis en Cellogel
Qué Separa
Proteínas (proteinogramas).
Funcionamiento
Separa las moléculas mediante un campo eléctrico en una tira comercial. Las moléculas de carga negativa migran hacia el ánodo y las positivas hacia el cátodo.
Características
Es una separación basada en la carga de las moléculas sobre un soporte de acetato de celulosa. Para el revelado, se necesita un densitómetro o fotómetro.
Electroforesis en Gel de Agarosa
Qué Separa
Fragmentos grandes de ADN y proteínas.
Funcionamiento
Se hace un molde con la preparación del gel de agarosa y se deposita el ADN o el ARN mezclado con un tampón TAE. Soporte con pocillos.
Características
Es una separación basada en la carga y el tamaño de las moléculas sobre un soporte de gel de agarosa. Tras el revelado, los componentes se identifican con un transiluminador de luz ultravioleta.
Electroforesis en PAGE
Qué Separa
Principalmente proteínas y fragmentos pequeños de ADN y ARN.
Funcionamiento
El proceso es el mismo que el de gel de agarosa. Puede ser desnaturalizante (pérdida de estructura proteica, más rápido) o no desnaturalizante (la proteína se mantiene intacta, útil para pruebas funcionales, enzimáticas y estudio de anticuerpos).
Características
Es una separación rápida basada en la carga y el tamaño de las moléculas sobre un soporte de acrilamida y bisacrilamida.
Electroenfoque
Qué Separa
Proteínas.
yo llevo viendo 20 minutos luego
Funcionamiento
Separa proteínas aplicando un campo eléctrico en un gel con un gradiente de pH y se detiene cuando la carga neta es cero. Tiene efectos focalizantes porque es capaz de hacer la técnica sin que haya muchas variaciones de pH.
Características
Es una separación de proteínas según su punto isoeléctrico y del gradiente de pH en un soporte de gel de poliacrilamida o agarosa.
Electroforesis Bidimensional
Qué Separa
Proteínas.
Funcionamiento
La primera dimensión es un electroenfoque y la segunda es una electroforesis en PAGE.
Características
Es una separación que combina dos técnicas de electroforesis y proporciona una visión muy detallada de la composición de la proteína y tiene menos margen de error.
Electroforesis en Campos Pulsantes
Qué Separa
Fragmentos grandes de ADN.
Funcionamiento
Es un proceso general, pero usando un molde de gel de agarosa y un campo eléctrico pulsante.
Características
Es una separación de fragmentos grandes de ADN utilizando un campo eléctrico alternante que permite la identificación genética precisa.