Leucocitos

RECUENTOS CELULARES:1- CONCEPTO: procedimiento para determinar el numero de células sanguineas por mm³ (leucocitos, hematies y plaquetas).Fases:__Dilución de la sangre.__Recuento de células.__Cálculo matemático.Métodos:__Manuales (en camara de recuento).__Automáticos (contadores electrónicos).2-RECUENTOS EN CAMARA.Material:__Camara de recuento(cámara cuentaglobulos o hemocitómetro):Placa gruesa de cristal en forma de forma rectangular.En la parte central tiene grabados uno o dos réticulos.varios tipos de reticulos:burker,neubauer y thoma.__Cubreobjetos:Se coloca sobre la cámara. Se deben observar los anillos de Newton,asi nos daremos cuenta si esta bien montada.La altura que queda entre el cubre y la cámara es de 0,1mm.__Pipeta de thoma:pipeta especial de cristal q constan de un largo tubo capilar graduado y deun bulbo.divida en 10 partes,la 5º division y 10 bien marcada.0,5 y 1.bulbo contiene una perla de vidrio para facilitar la mezcla de sangre con el liquido de dilucion.roja para recuento hematies y blanca para leucos.la de hematies tiene 100 veces mas capacidad,marca 101,y pipetas de leucos la capacidad es 10 veces mayor q la del tubo capilar largo,y en el corto hay marca de 11.__Goma de aspiración:tubo de goma q permite la aspiracion de la muestra y del liquido de dilucion.en 1 exrtemo se encaja la boquilla yx el otro se une al tubo capilar corto de la pipeta de thoma._:_:_:Se utilizan para dilui la muestra de sangre y transferirla a la camara.REACTIVOS:__Líquido de dilución:su composición varia según el tipo de células que queremos contar.__Hematies (l'iquido de Hayem): es una solución isotónica ,contiene cloruro sodico para hacerlo isotonico con el plasma,para evitar la alteraion morfologica e incluso la lisis de los hematies.si tiene precipitados antes de usarlo sera filtrado.__Leucocitos (líquido de Türck): contiene ácido acético q produce la lisis de los eritrocitos sin alterar los leucocitos,y violeta de genciana q tiñe el nucleo de los leucocitos para q estos pdan observarse mejor.pde ser sustituido x azul de metileno.__Plaquetas: consta de una sustancia hemólitica y un antiagregante plaquetario.__Muestra:sangre capilar o venosa anticoagulada con EDTA, convenientemente diluida. Limpieza del material:Cámara: aclarar con agua destilada y secar con un paño suave.Pipeta de Thoma:__Hacer pasar a traves de ella agua corriente.__Pasar 3 veces agua destilada.__Hacer pasar acetona o etanol.__Secar el interior con una pera.3.-RECUENTO EN CONTADORES ELECTRÓNICOS:3.1.COMPONENTES:Diluidor:Disminuye la concentración de la sangre hasta nivel adecuado para el funcionamiento del contador.kmo liquido diluyente utiliza una solucion isotonica con capacidad conductora.Compresor-aspirador:aporta la presión y el vacio necesarios para transportar la sangre diluiida al dispositivo de medida.Dispositivo de medida:lugar donde, por sistemas diferentes, se cuentan las células.Transductor:transforma las señales recibidas en el dispositivo de medida en impulsos electricos.suele ser 1fotomultiplicador.Discriminador:diferencia los impulsos correspondientes a cada tipo de celula contada.Lector:recoge los datos, los procesa y los proyecta en una pantalla.Registrador:imprime los resultados.3.2- METODOS ELECTRONICOS.METODO DE LA RESISTENCIA ELECTRICA O DE LA IMPEDANCIA:Fue descubierto por Coulter en 1956.Fundamento:__Las células sanguineas conducen mal la electricidad mientras que el diluyente es un buen conductor.__El didpositivo de medida consiste en un orificio con un electrodo a la entrada y otro a la salida, atraves del cual pasa la sangre.__Se aplica una corriente electrica al orificio.__Cuando el orificio es atravesado por una célula sanguinea se produce un aumento de la resistencia electrica y un cambio de potencial entre los electrodos y si es atravesado x solo un liquido diluyente la resistencia electrica medida x los electrodos es minima y constante.__El numero de señales electricas indica el numero de celulas sanguineas y la amplitud de la señal su tamaño..-.-.Cell coulter:Se basa en la medida de los cambios en la resistencia eléctrica que se producen cuando una partícula no conductora en suspensión en un electrolito atraviesa un pequeño orificio.METODO DE LA DISPERSIÓN DE LA LUZ O LA DIFRACCIÓN:Método del campo oscuro:Fundamento: la sangre diluida pasa por un capilar atravesado por una luz halógena.__Si no pasan células a traves del capilar: el haz de luz incide sobre una zona no sensible (disco de campo oscuro).__Si pasan células dispersan los rayos de luz y son captados por un fotodetector.__La intensidad de la señal es directamente proporcional al tamaño de la célula.Método del rayo laser(citómetro de flujo):__Un rayo laser atraviesa el capilar por donde circula la sangre diluida.__Cuando no pasan células el rayo laser incide sobre un detector.__Si pasa una célula, el rayo deja de incidir en el detector.__El número de interferencias indica el número de células y el grado de la interferencia es proporcional al tamaño de la célula.3.3-PARAMETROS QUE DETERMINA UN CONTADOR ELECTRONICO:__Recuento de hematies, leucocitos y plaquetas.__Porcentaje de reticulocitos: se utiliza el citometro de flujo. Se mide la cantidad de luz absorbida por una célula, , ya que es directamente proporcional a la cantidad de ARN que contiene.__Formula leucocitaria: se puede realizar por diferentes métodos:--Resonancia magnética nuclear: la conductividad de los diferentes leucocitos es diferente según su tamaño y su contenido celular.--Rayos laser: mide la difracción de la luz, que es diferente segun el tamaño y la composición interna de los leucocitos.--Examen automático del frotis.__Tincion de la peroxidasa:detecta la presencia de la encima peroxidasa en el citoplasma celular.Produce una coloración marron. Cada tipo de leucocito tiene una cantidad de peroxidasa:__Linfocitos:A pequeños y sin actividad peroxidasa.__Monocitos (B) y basófilos (C): de gran tamaño y ligera actividad peroxidasa.__Neutrófilos: ricos en peroxidasa, sobre todo los inmaduros.__Eosinofilos(D):+peques q neutrofilos, muy cargados de peroxidasa.__LUC(E):celulas de gran tamaño sin teñir. Pueden ser linfocitos grandes hiperactivos o células patológicas (linfoblastos o mieloblastos). Hasta una proporcion del 4% es normal.-.-..-.-Con todos estos datos el autoanalizador obtiene el MPXI (indice de actividad peroxidasa media) , valor que nos informa de la presencia de celulas jovenes en abundancia (valores mas altos de lo normal entre -10 y +10).__Indices eritrocitarios:--VCM: la magnitud del impulso generado al paso de cada hematie, es proporcional a su tamaño.--ADE /anchura de distribución eritrocitaria): se calcula a partir de la representación grafica del tamaño de los eritrocitos.--HCM: se calcula partir de la concentración de hemoglobina y del recuento de hematies HCM= (Hb/RBC) x10.--CHCM: se calcula a partir de la concentración de hemoglobina y del hematocrito CHCM= (Hb/Hto)x100.__Determinación de la hemoglobina: se realiza despues de la lisis de los hematies y la transformación de la hemoglobina en cianmetahemoglobina, cuya cantidad se mide espectrofotometricamente.__Velocidad de sedimentación globular: los contadores utilizan tubos con citrato y sangre, se dejan reposar 30'y se lee mediante un sensor luminoso, el inicio de la columna de hematies

TEMA 18:INDICES ERITROCITARIOS:1.-RECUENTO DE SCHILLING:Fundamento:consiste en cuantificar el nº de formas juveniles y el de formas maduras de los neutrofilos q estan presentes en la sangre periferica,y relacionar ambos valores.Calculo:IS=%formas juveniles/%segmentados.Valoracion:en sangre periferica 1 forma juvenil x kda 16 maduras.knd aumenta pooorcentaje de formas juveniles de los neutrofilos en la sangre periferica->desviacion a la izquierda,y knd asciende %segmenta2->desviacion derexa.2.-RECUENTO ARNETH:lobularidad:Fundamento:contar nºlobulaciones q tiene ºdet.cantidad de neutrofilos y seguidamente calcular nº lobulos qhay xkda neutrofilo.sehace knautoanalizadores. 5 tipos: tipo1:no segmentado,no lubulaciones. tipo2:dividido1 vez,2 lobulos.tipo3:dividido 2 veces,3 lobulos,hasta tipo5.div4,5lob.Calculo:conociendo nº de neutrofilos de kda tipo de Arneth q hay en la sangre periferica,se pde calcular el nº de lobulos q tiene 1det cantidad de neutrofilos,yxtanto es posible saber el nº de lobulos x neutrofilo.Valoracion:Il normal comprendido entr 1,9 y3.si el IL es menor 1 1,9->desviacion a la izquierda,si es mayor q3->desv derexa.

TEMA 6:RECUENTO DE HEMATIES:FUNDAMENTO:RBC,det. de nº de eritrocitos presentes en un vol det. de sangre.1mm3.para recuento en camara de glob.rojos se diluye la sangre problema en un liquido apropiado y posteriormente se deposita en la camara de recuento,dnde se cuentan las cel presentes en algunos cuadrados de uno de los reticulos.MATERIAL:__pipeta diluidora de toma para rec glob rojos,tubo de goma con boquilla adaptable a la pipeta diluidora__camara de recuento con un reticulo tipo neubauer mejorado__cubre especil para recuento en camara__microscopio.RECTIVOS:Hayem.MUESTRA:sangre capilar obtenida x puncion del pulpejo de un dedo o sangre venosa procedente de una puncion venosa y anticoagulada con EDTA.FUNDAMENTO:1º.-poner cubre sobre reticulo de la camara,humedeciendolo con saliva,y ejercinedo ligera presion.2º.-aspirar la sangre asta 0.5 si se cree q pde aver una policitemia y asta 1 si se piensa q pde existir una anemia.si sobrepasa enrase se toca punta con papel para q baje.3º.-limpiar el exterior de la pipeta con papel sin q baje la sangre.4º.-aspirar liquido diluyente asta 101.5º.-desenganxar el tubo de goba de la pipeta y omogeneizar el contenido del bulbo.se sujeta la pipeta x los extremos y se agita en orizontal durante 2-3min.6º.-desexar 3 primeras gotas emitidas x la pipetas q corresponden al liquido presente en el tubo capilar largo de la pipeta de thoma,q no esta mezclado con la sangre.7º.-depositar la siguiente gota entre la camara y el cubre,acercandola y edjando q penetre dentro x capilaridad en el espacio existente entre las 2 estructuras.8º.-dejar reposar la sangre diluida q sta en la camara durante unos minutos,para q las cel presentes pdan sedimentarse.9º.-enfocar el reticulo con el objetivo de 40x y con el condensador a baja altura y verificar q la distribucion de los hematies es homogenea.10º.-contar los hematies presentes en 80 cuadraditos peq del cuadrado grande central.4 cuadrados de las esquinas y el central.LECTURA DE RESULTADOS:Se cuentan los hematien en zig-zag,y se cuenta el de arriba y derexa/izq, el abajo cuando lleguemos abajo y el ste arriba.se cuenta en el cuadro grande central,en los 5 cuadritos peqs.se cuentan 80 cuadritos peq centrales.RBC,hemties/mm3=Cx5x10xD.kmo contamos los hematies presentes en 5 cuadros,y este tiene 25 cuadritos,hay q multiplicar x 5 los hematies obtenidos.kmo la long de kda1 de los lados del cuadrado grande central es de 1mm,y la long del espacio comprendido entre este y el cubre es de 0.1mm hay q mult x 10el result anterior,para det. el nº de hematies existentes,no en 0,1 mm3 sino en 1mm3.kmo sangre antes del recuento se diluye multiplicar x100 si se ha partido de sangre entera contenida hasta el enrase de 1 o x 200 si se ha partido de sangre entera contenida asta enrase 0.5,para calc las diluciones realizadas no se tienen en cuenta el liquido contenido en el tubo capilar largo de la pipeta diluidora,pues se considera q este no se mezcla con el resto a nivel del bulbo.:-.-.-disminuicion de rbc en anemias y aumento en policitemias.V.N.entre 4 y 5,5 millones/mm3 mujeres y 4,5-6 hombres.TEMA 17:RECUENTO DE LEUCOCITOS(WBC).FUNDAMENTO:determinacion del nº de leucocitos presentes en un volumen determinado de sangre,1mm3.tecnia zig-zag.MATERIAL:__pipeta diluidora de thoma para globulos blancos__tubo de goma con boquilla q se adapta a la pipeta diluidora__camara de recuento con un reticulo tipo Neubauer mejorado.__cubre especial__microscopio.RECTIVOS:de turck.FUNDAMENTO:= q recuento de hematies pero se cuenta los leucocitos presentes en los 4 cuadrados grandes de las esquinas del reticulo,q cada uno est dividido en 16 cuadritos medianos.si se vee bn ,se pde contar con el objetivo de 10x-.INTERPRETACION CLINICA RESULTADOS:WBC= L/4x10xD__como se cuentan los leucos en 4 campos, se divide x4 para saber en 1.se cuenta en los cuadros grandes.kmo la longitud de cada 1 de los lados de los cuadrados grandes es de 1mm,yla long del espacio comprendido entre estos y el cubre es de 0,1 mm, hay q multiplicar x10 el result anterior,para det. el nº de leucocitos existentes en 1 mm3.como la sangre previamente al recuento se diluye,hay q multiplicar x10 si se aprte de sangra entera contenida hasta el enrase de1 o x 20 si se ha partido dela sangre entera contenida hasta el enrase de 0,5.d_factor de dilucion->cantidad q entra en el bulbo,lode+ se desprecia...-.-.-.-disminuicion->leucopenias.aumento->leucocitosis.V.N.entre 5 y 11.000 leuc/mmm3 de sangre.TEMA 24:RECUENTO INDIRECTO DE PLAQUETAS:INTRODUCCION:consiste en la det. del nº de trombocitos presentes en un volumen determinado de sangre.1mm3.el recuento de plaquetas puede realizarse,de una forma aproximada contando los trombocitos presentes en varios campos de una extension sanguinea observada microscopicamente.pde ser+exacto mediante el empleo de una camara de recuento o con contadores electronicos de celulas.el recuento de plaquetas practicado mediante el examen de un frotis sanguineo permite ade+ el estudio de la morfologia de los trombocitos.MATERIAL:-microscopio-papel-boli.RECTIVOS:liquido de inmersion.MUESTRA:extension de sangre problema teñida con metodo tradicional.TECNICA:contamos los hematies y plaquetas en 10 campos.1º.-observar frotis sanguineo con objetivo de inmersion del microscopio.2º.-elegir una parte donde las cel. no estan superpuestas.3º.-contar el nº de plaqutas en 10 cmpos microscopicos.4º.-calcular cifra media.formula : PLT/mm3=PLT/C(plaquetas contadas)x20.000.INTERPRETACION CLINICA RESULTADOS:normal, debe haber 1 plaqueta x cada 10-20 hematies.de 5 a 25 trombocitos x campo.si inferior a 130.000->trombocitopenia y si superior a 400.000->trombocitosis.