Clasificación y Características de Cocos Gram Positivos y Bacilos Gram Negativos

Cocos Gram Positivos

1. Clasificación

Nos encontramos con las siguientes familias:

• Familia Micrococcaceae
• Familia Streptococcaceae

Para diferenciar una familia de otra se utilizan las siguientes pruebas:

A. Morfología tras tinción de Gram

• Familia Micrococcaceae: Gram +, cocos redondos en racimos o tétradas.
• Familia Streptococcaceae: Gram +, cocos elípticos agrupados en cadenas.

B. Prueba de la catalasa

Prueba fundamental para la diferenciación. No se hace en agar sangre porque darían positivo las dos y no se podría diferenciar. Se basa en poner en contacto el microorganismo (MO) con peróxido de hidrógeno. Si este posee la enzima catalasa, lo descompone en H₂O y O₂. Gota de agua oxigenada + MO:

• Catalasa + (burbujas) → Micrococcaceae
• Catalasa - → Streptococcaceae

C. Siembra en manitol y agar sangre

• Si crecen, de forma especial los Staphylococcus.
• No crecen.

D. Prueba de la oxidasa

• Negativa
• Negativa

+ → cuando cambia a morado. Para determinar si tiene la enzima citocromo oxidasa. Oxida un compuesto (tira). Para comprobar que son Gram + y diferenciar de los Gram -.

2. Familia Micrococcaceae

2.1. Género Micrococcus

Forman tétradas, respiración aeróbica. Sensible a la bacitracina.

2.2. Género Staphylococcus

1. Características

• Cocos Gram + en racimos.
• Respiración anaerobia facultativa.
• Resistente a la bacitracina.
• Catalasa +.
• Oxidasa -.

2. Medios

(Primero se siembra, luego se realiza la prueba de catalasa y coagulasa):

• Manitol salado:
  • Manitol +: colonias amarillas.
  • Manitol -: colonias rosas.
• Agar sangre: puede tener hemólisis.

Prueba de Hugh-Leifson:

• 1º tubo → MO aerobios.
• 2º tubo: con vaselina, MO anaerobios.
• Si no cambia nada: no ha metabolizado la glucosa, no la utiliza.
• Cambia:
  • 1º - A*: metabolismo oxidativo.
  • 2º - *A: metabolismo fermentativo.
  • 3º: AA: metabolismo oxidativo fermentativo.

Staphylococcus aureus:

• Colonias doradas.
• Manitol + (amarillo).
• Patógeno.
• Transmisión por las manos.

Patologías:

En piel:

• Foliculitis: infección de los folículos pilosos.
• Forúnculos: infección de varios folículos pilosos.
• Impétigo: ampolla en la piel, costra amarilla cuando se rompe.
• Celulitis: infección e inflamación del tejido conectivo de la piel.
• Carbunco: ántrax, pústula, ampolla que da lugar a una costra negra.

Otros:

• Meningitis.
• Neumonías.
• Endocarditis.
• Síndrome de shock tóxico.
• Toxi-infección alimentaria.

Staphylococcus epidermidis: saprofito, manitol -. Infecciones nosocomiales: bacteriemias, infecciones urinarias.

Staphylococcus saprophyticus: saprofito, manitol -, infecciones nosocomiales, sobre todo urinarias.

Staphylococcus haemolyticus: saprofito, hemólisis, infecciones nosocomiales: septicemia, infecciones urinarias.

3. Familia Streptococcaceae

Características

• Cocos Gram + en cadenas.
• Aerobios y anaerobios facultativos.
• Catalasa -.
• Oxidasa -.
• Habitan en la piel, aparato digestivo y respiratorio.

2. Medios

• Agar sangre: permite ver la hemólisis.
  • Alfa: hemólisis parcial, glóbulos rojos (verdosa).
  • Beta: hemólisis total.
  • Gamma: no hemólisis.
• Agar chocolate.

Clasificación por tipo de hemólisis y por Rebecca Lancefield: en función del carbohidrato de la pared celular (A, B, C).

• Género Enterococcus
• Género Streptococcus

Streptococcus pyogenes: Cocos Gram +, beta hemolítico. Hábitat: mucosa orofaríngea. Grupo A de Lancefield.

Metabolitos

Exotoxinas:

• Toxina eritrogénica: es la responsable del exantema en la escarlatina.
• Hemolisinas:
  • La estreptolisina S, no presenta carácter antigénico.
  • La estreptolisina O, presenta carácter antigénico, por lo que los enfermos o convalecientes de una enfermedad estreptocócica poseen regularmente en su suero anticuerpos frente a la estreptolisina O. Antígeno ASLO. Con O₂ se inactiva.

Factores de preparación:

• Estreptoquinasa.
• DNAasa.
• Hialuronidasas.
• Tejido conectivo.

Patologías:

Supurativas:

• Faringitis.
• Fiebre escarlatina: manchas rojas.
• Erisipela: inflamación de la dermis y epidermis.
• Celulitis.
• Fiebre puerperal.
• Sepsis.
• Meningitis.
• Endocarditis.

No supurativas: aunque se tenga la enfermedad, no se encuentra el microorganismo. Autoinmunes: anticuerpos → corazón: endocarditis; riñón: glomerulonefritis; articulación: fiebre reumática.

Streptococcus agalactiae: grupo B de Lancefield. Cocos Gram + en cadenas. Beta hemolítico. Hábitat: mucosa vaginal.

• Meningitis en recién nacidos o sepsis.
• Infecciones urinarias.

Bacilos Gram Negativos: Enterobacterias

Características: anaerobios facultativos, catalasa +, oxidasa -, todos fermentan la glucosa.

3 tipos de antígenos

• Antígeno capsular K (Vi).
• Antígeno somático O.
• Antígeno flagelar H.

Kligler: permite hallar la fermentación de glucosa, lactosa, gas y SH₂.

LIA: descarboxilación de lisina, vemos si la bacteria tiene la lisina descarboxilasa. Morado: sí. Morado, amarillo: no. Rojo, amarillo: desaminación.

Citrato: citrato de Simmons. Para determinar si la bacteria utiliza citrato como única fuente de carbono. Azul: +. Verde: -. Si hay crecimiento y no cambio → +.

Indol: agua de peptona. Determina que el MO tenga la enzima triptofanasa. Reactivo de Kovacs. Rojo: +. Amarillo: -.

Urea: determina la enzima ureasa. Rosa: +. Naranja: -. Con calor se deshace.

Manitol movilidad: fermentación, movilidad. 37 ºC, 24 h → Móvil: crece en la picadura y su alrededor → Manitol +: amarillo, negro/rojo.

Rojo de metilo: Clark-Lubs. Fermentación de las enterobacterias → Productos ácidos: fermentación ácido-mixta. Rojo de metilo. → Productos neutros: fermentación butilenglicólica - acetoína - VP. Alfa-naftol e hidróxido, lactosa. Disco de ONPG, compuesto similar a la lactosa.

Enfermedades que producen gastroenteritis

Escherichia coli: Bacilo Gram -, móvil, lactosa +, flora normal intestinal, indicador de contaminación fecal en agua.

Patologías: gastroenteritis, infecciones urinarias, meningitis en recién nacidos, pielonefritis, endocarditis, bacteriemia, infecciones de heridas.

• E. coli enterotoxigénica: toxina, enfermedad del viajero, cólera infantil.
• E. coli enteropatógena: diarreas infantiles, heces con moco y poca sangre.
• E. coli enteroinvasiva: disentería. Heces con sangre, moco y pus.
• E. coli enterohemorrágica: colitis hemorrágica. Síndrome urémico. Heces con poca sangre.

Salmonella: Bacilo Gram -, móvil, lactosa -, sulfhídrico en Kligler.

Patologías:

• Fiebre tifoidea:
  • 1ª semana: aumento de la temperatura, cefaleas, malestar.
  • 2ª semana: manchas rojas, fiebre en mesetas.
  • 3ª semana: perforación intestinal.

  Diagnóstico por métodos directos con hemocultivo y coprocultivo, e indirectos por métodos inmunológicos.

• Gastroenteritis: periodo de incubación de 28-48 h, diarreas, vómitos, fiebre. Huevos, carne poco hecha. Diagnóstico por coprocultivo, siembra en caldo selenito con resiembra en Hektoen y Hektoen o SS.

Shigella: Bacilo Gram -, inmóvil, lactosa -.

Patología: Disentería bacilar (por Shigella), amebiana (por Entamoeba coli).

Yersinia:

• Y. enterocolitica: síntomas: fiebre, diarrea, dolor en cuadrante inferior derecho, pseudoapendicitis. Crecimiento exigente, agar Yersinia.
• Y. pestis:
  • Peste bubónica.
  • Peste neumónica.
  • Peste septicémica.

Oportunistas

Klebsiella pneumoniae: colonias mucoides grandes. Neumonía. Hemorragias, esputo sanguinolento y moco.

Proteus: putrefacción cadavérica. Gram -, lactosa -, urea +.

Serratia marcescens: Gram -, lactosa -, produce el pigmento prodigiosina, resistencia a gran número de antibióticos.

Relación Huésped-Bacteria. Infección

Enfermedad: proceso que supone una alteración en el funcionamiento normal de alguna parte del organismo. Duración y gravedad variable.

• Infecciosa: causada por la entrada en el cuerpo de un agente infeccioso externo que crece y se multiplica en su interior causando daños (como bacterias, virus, hongos, parásitos), pudiendo pasar de persona a persona por diferentes mecanismos (contacto físico, agua, sangre). El cuerpo humano combate contra estas enfermedades con el sistema inmunitario.
• No infecciosa: no se transmite de persona a persona, sino por causas del entorno laboral, ambiental, vejez, genético.

Infección bacteriana: entrada, establecimiento y multiplicación de bacterias en la superficie o interior del huésped que va asociada a una respuesta específica; pudiendo o no ir acompañada de manifestaciones clínicas.

Colonización bacteriana: capacidad de las bacterias para establecerse y multiplicarse en la piel y/o mucosas del huésped en cantidades suficientes que permitan mantener un cierto número poblacional; sin que su presencia establezca o determine respuestas clínicas ni inmunológicas.

Infección inaparente o subclínica (asintomática): establecimiento de bacterias que, si bien induce una respuesta orgánica específica, no va seguida de manifestaciones clínicas; se debe al escaso número de bacterias, a que estas son poco virulentas o a que el huésped presenta un normal funcionamiento de sus defensas.

Patogenicidad o poder patógeno: capacidad de producir daño o enfermedad por parte de una determinada especie de microorganismo. Hace referencia a la especie.

Postulados de Koch: condiciones que se deben cumplir para que un microorganismo o parásito sea considerado agente etiológico de una enfermedad:

• El agente debe encontrarse siempre en la enfermedad.
• Se debe poder aislar en cultivo puro.
• Tras inocular el cultivo a animales de experimentación, se debe reproducir la enfermedad original.
• Se debe poder volver a aislar el mismo microorganismo en cultivo puro.
• Se deben poder detectar, en la sangre de los enfermos y animales de experimentación, los anticuerpos correspondientes a los gérmenes en cuestión.

Cadena epidemiológica:

• Fuente: agente infeccioso → origen → personas: enfermas (activa), convaleciente (pasiva), asintomáticos; animal; suelo; agua.
• Mecanismo de transmisión:
  • Directo: ETS, físico, aéreo, parenteral.
  • Indirecto: vector (artrópodos, peste bubónica), fómites (material contaminado), alimento, agua.
• Huésped: persona sana, convaleciente, inmunodeprimida, vejez, embarazo.

Reservorio: lugar en el que el agente infeccioso se encuentra normalmente, en el que lleva una vida poco activa, pero conserva la capacidad de infectar al organismo humano.

Vector: ser vivo que sirve de vehículo para la transmisión del agente patógeno causante de cierta enfermedad.

Epidemiología: ciencia que estudia las enfermedades.

• Endemia: enfermedad localizada en una misma zona durante años (malaria).
• Epidemia: en un mismo país, está más localizada, aparición súbita de la enfermedad que ataca a gran número de individuos en una región determinada temporalmente.
• Pandemia: enfermedad que llega a varios países, continentes. Supera el número de casos esperados y persiste en el tiempo. SIDA.

Infección hospitalaria, nosocomial: infección contraída por personas ingresadas en el hospital, pero no por ese problema. Infecciones urinarias, las más frecuentes, por sondas prolongadas o sin la precaución debida. Vías respiratorias, heridas quirúrgicas.

Factores de riesgo:

• La propia susceptibilidad del individuo, influye la edad, estado nutricional, gravedad de la enfermedad, estancia prolongada.
• Procedimientos diagnósticos y terapéuticos → cada vez más agresivos, tratamientos con corticoides, inmunodepresores → facilitan la infección por microorganismos oportunistas.
• Empleo de antibióticos prolongado.
• Gran contacto con el personal.

Enfermedad del viajero: enfermedad adquirida cuando se viaja a una zona endémica de una enfermedad. Enfermedad de un sitio adquirida por el viajero.

Precauciones:

• Vacunación.
• Beber solo agua embotellada.
• No lavar alimentos con agua del grifo.
• No bañarse en ríos.
• Hervir bien las verduras y lavar con agua embotellada.
• No caminar descalzo.
• Repelentes de mosquitos.
• Impedir enfermedades de transmisión sexual: preservativo.

Desinfección y Esterilización

Desinfección: eliminación de microorganismos patógenos, pero no sus formas de resistencia.

Tipos

• Físicos: ebullición 20 minutos, radiaciones UV.
• Químicos: desinfectantes (lejía), antisépticos (Betadine).

Esterilización: ausencia total de microorganismos patógenos y no patógenos, y formas de resistencia.

Tipos

• Físicos:
  • Calor húmedo:
    • Autoclave: aumento de presión para aumentar la temperatura de ebullición. 20 minutos, 1,2 atm, 121 ºC.
    • Pasteurización: elimina bacterias a 62 ºC durante 30 minutos o 72 ºC durante 15 segundos.
    • Uperización: 150 ºC durante 5 segundos.
    • Tindalización: ebullición consecutiva.
  • Calor seco:
    • Flameado: calentar hasta incandescencia.
    • Incineración: incinerador de bacterias, campana de seguridad.
    • Horno Pasteur/Pupinel: calienta hasta 200-250 ºC. Elimina todo a 180 ºC durante 2 horas.
  • Filtración: filtro que retiene bacterias. Para líquidos termolábiles.
  • Radiaciones: ionizantes, UV: esterilidad superficial.
• Químicos:
  • Autoclave de óxido de etileno: gas volátil, plástico. Gran poder de penetración, esterilización efectiva y duradera.
  • Glutaraldehído: para sustancias termolábiles, líquido diluido a pH alcalino.
  • Formol: para esterilizar sondas.

Controles de esterilización

• Físicos: nos dice si el aparato funciona bien. Termómetro.
• Químicos:
  • Cintas adhesivas: tiras que se oscurecen. Detectan solo la temperatura. Cambio uniforme con rayas negras → correcto.
  • Tiras reactivas: especifican tiempo y temperatura. El color inicial cambia. 1 cuadro: incorrecto, ha penetrado aire. 2 cuadritos: bien. 3: no, condiciones sobrepasadas.
  • Control de Bowie-Dick: calidad del vapor.
• Biológicos: reactivo dentro de un tubo. Se rompe la ampolla tras la esterilización y se pone a 37 ºC durante 24 h. Crece - medio turbio, idóneo cuando se mantiene igual. Si es capaz de matar o no la espora. Si crece la espora → pasa a color verde → incorrecto.