Conceptos Fundamentales en Bioquímica y Biología Forense
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Este documento presenta una recopilación de principios y técnicas esenciales en el ámbito de la bioquímica y su aplicación en la biología forense, abarcando desde métodos de identificación de fluidos biológicos hasta las funciones vitales de las macromoléculas.
Técnicas de Identificación de Fluidos Biológicos
Absorción-Dilución
Con esta técnica se obtienen buenos resultados en manchas de sangre, saliva, sudor, etc., de individuos secretores. Si un antisuero de título conocido se agrega a una mancha de sangre y luego se titula nuevamente, podemos observar si su título disminuyó o se mantuvo. Consiste en confrontar porciones de las manchas a analizar con suero anti-A y anti-B, respectivamente. Paralelamente, se debe practicar un ensayo en blanco (sin mancha). La disminución de anticuerpos indicará en la mancha de sangre la presencia del antígeno respectivo. Por ejemplo, si el título del anti-A disminuyó, indica grupo B.
Absorción-Elución
Se conoce como elución ya que se realiza la disociación del complejo antígeno-anticuerpo. Por calentamiento se rompe el complejo formado inicialmente y se liberan los anticuerpos que, al estar en contacto con glóbulos rojos de grupo conocido, formarán el complejo antígeno-anticuerpo. Si se produjo elución de anti-A, se aglutinará con los glóbulos rojos A.
Orientación en la Detección de Sangre
Pruebas Químicas de Orientación
- Medeinger: Incoloro, al oxidarse en presencia de H₂O₂ y peroxidasas de la sangre, da color verde. Son sensibles y detectan sangre diluida.
Reacción: H₂O₂ → O₂(red) + H₂O(ox)
- Luminol (3-aminoftalhidrazida): Utilizado para grandes superficies y manchas invisibles. Es más eficaz con muestras envejecidas o con HCl.
Detección de Fosfatasa Ácida Prostática (FAP)
La FAP se cuantifica por la cantidad de enzima que, sobre un sustrato de fenilfosfato disódico a 37 °C y pH 4,5, produce 1 mg de fenol en 1 hora.
Macromoléculas Biológicas Esenciales
Funciones Biológicas de los Lípidos
- Estructural: Son parte fundamental de la membrana celular.
- Energética: Actúan como reserva de energía.
- Termoaislante: Forman una barrera que impide la pérdida de calor.
- Reguladora: Algunos lípidos actúan como hormonas.
- Mensajeros: Funcionan como segundos mensajeros en la señalización celular.
Funciones de las Proteínas
- Transporte: Algunas se unen a sustancias y las transportan (ej., hemoglobina).
- Defensa: Los anticuerpos son proteínas presentes en la sangre, producidas por linfocitos B.
- Estructural: Algunas forman parte de las membranas celulares y tejidos (ej., colágeno).
- Enzimática: Las enzimas aceleran la velocidad de las reacciones bioquímicas.
- Reserva: Sirven como fuente de reserva de aminoácidos.
- Reguladoras: Muchas hormonas son proteicas (ej., insulina).
Enzimas: Catalizadores Biológicos
Las enzimas son catalizadores biológicos que:
- Aumentan la velocidad de reacción.
- No participan directamente en la reacción (no se consumen).
- Son específicas para sus sustratos.
- Son proteínas, excepto las ribozimas.
- Son saturables.
- Su actividad varía con el pH y la temperatura.
De acuerdo a la reacción que catalizan, se clasifican en:
- Oxidorreductasas
- Transferasas
- Hidrolasas
- Liasas
- Isomerasas
- Ligasas