Técnicas de identificación de fluidos biológicos y funciones de macromoléculas

Este documento presenta una recopilación de principios y técnicas esenciales en el ámbito de la bioquímica y su aplicación en la biología forense, abarcando desde métodos de identificación de fluidos biológicos hasta las funciones vitales de las macromoléculas.

Técnicas de Identificación de Fluidos Biológicos

Absorción-Dilución

Con esta técnica se obtienen buenos resultados en manchas de sangre, saliva, sudor, etc., de individuos secretores. Si un antisuero de título conocido se agrega a una mancha de sangre y luego se titula nuevamente, podemos observar si su título disminuyó o se mantuvo. Consiste en confrontar porciones de las manchas a analizar con suero anti-A y anti-B, respectivamente. Paralelamente, se debe practicar un ensayo en blanco (sin mancha). La disminución de anticuerpos indicará en la mancha de sangre la presencia del antígeno respectivo. Por ejemplo, si el título del anti-A disminuyó, indica grupo B.

Absorción-Elución

Se conoce como elución ya que se realiza la disociación del complejo antígeno-anticuerpo. Por calentamiento se rompe el complejo formado inicialmente y se liberan los anticuerpos que, al estar en contacto con glóbulos rojos de grupo conocido, formarán el complejo antígeno-anticuerpo. Si se produjo elución de anti-A, se aglutinará con los glóbulos rojos A.

Orientación en la Detección de Sangre

Pruebas Químicas de Orientación

• Medeinger: Incoloro, al oxidarse en presencia de H₂O₂ y peroxidasas de la sangre, da color verde. Son sensibles y detectan sangre diluida.

  Reacción: H₂O₂ → O₂(red) + H₂O(ox)

• Luminol (3-aminoftalhidrazida): Utilizado para grandes superficies y manchas invisibles. Es más eficaz con muestras envejecidas o con HCl.

Detección de Fosfatasa Ácida Prostática (FAP)

La FAP se cuantifica por la cantidad de enzima que, sobre un sustrato de fenilfosfato disódico a 37 °C y pH 4,5, produce 1 mg de fenol en 1 hora.

Macromoléculas Biológicas Esenciales

Funciones Biológicas de los Lípidos

• Estructural: Son parte fundamental de la membrana celular.
• Energética: Actúan como reserva de energía.
• Termoaislante: Forman una barrera que impide la pérdida de calor.
• Reguladora: Algunos lípidos actúan como hormonas.
• Mensajeros: Funcionan como segundos mensajeros en la señalización celular.

Funciones de las Proteínas

• Transporte: Algunas se unen a sustancias y las transportan (ej., hemoglobina).
• Defensa: Los anticuerpos son proteínas presentes en la sangre, producidas por linfocitos B.
• Estructural: Algunas forman parte de las membranas celulares y tejidos (ej., colágeno).
• Enzimática: Las enzimas aceleran la velocidad de las reacciones bioquímicas.
• Reserva: Sirven como fuente de reserva de aminoácidos.
• Reguladoras: Muchas hormonas son proteicas (ej., insulina).

Enzimas: Catalizadores Biológicos

Las enzimas son catalizadores biológicos que:

• Aumentan la velocidad de reacción.
• No participan directamente en la reacción (no se consumen).
• Son específicas para sus sustratos.
• Son proteínas, excepto las ribozimas.
• Son saturables.
• Su actividad varía con el pH y la temperatura.

De acuerdo a la reacción que catalizan, se clasifican en:

1. Oxidorreductasas
2. Transferasas
3. Hidrolasas
4. Liasas
5. Isomerasas
6. Ligasas