Diagnóstico Microbiológico de Campylobacter en el Laboratorio Clínico
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Diagnóstico de Campylobacter en Muestras de Heces
Heces: Las tres especies implicadas en cuadros diarreicos tienen en las heces la muestra de elección. Se recomienda el cultivo directo de las heces en medio selectivo; si se tiene que posponer la siembra, se utilizan medios de transporte como el Cary-Blair o Thayer-Martin.
En estas condiciones de siembra no inmediata, Campylobacter es viable de 1 a 3 semanas a temperaturas de refrigeración.
Medios Selectivos para el Aislamiento
Los medios selectivos más utilizados para Campylobacter son:
- Medio Skirrow: Es un agar con sangre de caballo y tres antibióticos (vancomicina, polimixina B y trimetoprim).
- Medio Butzler: Compuesto por agar tioglicolato, sangre, orina y suplementado con 5 antibióticos (bacitracina, novobiocina, colistina, cicloheximida y cefazolina).
- Agar Campy-Bap: Con sangre ovina y los mismos antibióticos del medio Skirrow, más cefalotina y anfotericina.
Condiciones Críticas para el Cultivo
El cultivo de Campylobacter en el laboratorio debe cumplir tres condiciones fundamentales:
- Utilizar los medios selectivos mencionados.
- Incubar los medios en atmósferas microaerófilas: (Baja concentración de oxígeno). Esto se consigue utilizando bolsas de plástico especiales que se sellan herméticamente; en ellas se introducen los medios de cultivo y el contenido de un sobre para lograr la atmósfera microaerófila.
- Temperatura especial de incubación: Los Campylobacter crecen a 37 ºC, pero su temperatura óptima de crecimiento es de 42 ºC durante 48 a 72 horas.
Otro método para poder aislar Campylobacter a partir de heces consiste en utilizar un filtro de acetato de celulosa con tamaño de poro
Diagnóstico de Campylobacter en Muestras de Sangre
Sangre: La presencia de C. jejuni y C. laridis suele ser intestinal, pero pueden atravesar la mucosa gástrica y llegar al torrente sanguíneo. Es conveniente realizar una siembra primaria de la sangre en un frasco con medio líquido y, posteriormente, trasladarlo a un medio de cultivo sólido e incubarlo en atmósfera microaerofílica, pero a 37 ºC.
Identificación y Diferenciación de Especies
También se puede realizar un examen en fresco para observar su movilidad. Por último, para diferenciar las distintas especies, se realizan las siguientes pruebas:
- Reacciones de catalasa y oxidasa positivas.
- Cultivo a diferentes temperaturas: 25 ºC, 37 ºC y 42 ºC.
- Prueba de reducción de nitratos.
- Producción de ácido sulfhídrico en medio KIA.