Diagnóstico microbiológico de Campylobacter en heces y sangre

Resumen

El documento describe el diagnóstico de Campylobacter a partir de muestras de heces y de sangre en el laboratorio clínico. Explica los medios selectivos de aislamiento (Skirrow, Butzler y Campy-Bap), las condiciones de cultivo en atmósfera microaerófila y las temperaturas de incubación. Además, recoge las pruebas bioquímicas que permiten diferenciar las especies.

Puntos clave

Las heces son la muestra de elección; el cultivo directo en medio selectivo es lo recomendado.
Si la siembra se retrasa, se usan medios de transporte como Cary-Blair o Thayer-Martin; Campylobacter es viable de 1 a 3 semanas refrigerado.
Los medios selectivos habituales son Skirrow, Butzler y Campy-Bap, todos con antibióticos inhibidores.
El cultivo requiere atmósfera microaerófila, obtenida con bolsas herméticas y un sobre generador.
El crecimiento óptimo se da a 42 ºC durante 48 a 72 horas, aunque crece a 37 ºC.
En sangre se hace una siembra primaria en medio líquido y después se pasa a medio sólido en atmósfera microaerofílica.

Ponte a prueba

Diagnóstico de Campylobacter en Muestras de Heces

Heces: Las tres especies implicadas en cuadros diarreicos tienen en las heces la muestra de elección. Se recomienda el cultivo directo de las heces en medio selectivo; si se tiene que posponer la siembra, se utilizan medios de transporte como el Cary-Blair o Thayer-Martin.

En estas condiciones de siembra no inmediata, Campylobacter es viable de 1 a 3 semanas a temperaturas de refrigeración.

Medios Selectivos para el Aislamiento

Los medios selectivos más utilizados para Campylobacter son:

Medio Skirrow: Es un agar con sangre de caballo y tres antibióticos (vancomicina, polimixina B y trimetoprim).
Medio Butzler: Compuesto por agar tioglicolato, sangre, orina y suplementado con 5 antibióticos (bacitracina, novobiocina, colistina, cicloheximida y cefazolina).
Agar Campy-Bap: Con sangre ovina y los mismos antibióticos del medio Skirrow, más cefalotina y anfotericina.

Condiciones Críticas para el Cultivo

El cultivo de Campylobacter en el laboratorio debe cumplir tres condiciones fundamentales:

Utilizar los medios selectivos mencionados.
Incubar los medios en atmósferas microaerófilas: (Baja concentración de oxígeno). Esto se consigue utilizando bolsas de plástico especiales que se sellan herméticamente; en ellas se introducen los medios de cultivo y el contenido de un sobre para lograr la atmósfera microaerófila.
Temperatura especial de incubación: Los Campylobacter crecen a 37 ºC, pero su temperatura óptima de crecimiento es de 42 ºC durante 48 a 72 horas.

Otro método para poder aislar Campylobacter a partir de heces consiste en utilizar un filtro de acetato de celulosa con tamaño de poro

Diagnóstico de Campylobacter en Muestras de Sangre

Sangre: La presencia de C. jejuni y C. laridis suele ser intestinal, pero pueden atravesar la mucosa gástrica y llegar al torrente sanguíneo. Es conveniente realizar una siembra primaria de la sangre en un frasco con medio líquido y, posteriormente, trasladarlo a un medio de cultivo sólido e incubarlo en atmósfera microaerofílica, pero a 37 ºC.

Identificación y Diferenciación de Especies

También se puede realizar un examen en fresco para observar su movilidad. Por último, para diferenciar las distintas especies, se realizan las siguientes pruebas:

Reacciones de catalasa y oxidasa positivas.
Cultivo a diferentes temperaturas: 25 ºC, 37 ºC y 42 ºC.
Prueba de reducción de nitratos.
Producción de ácido sulfhídrico en medio KIA.

Preguntas frecuentes

¿Cuál es la muestra de elección para diagnosticar Campylobacter?

Las heces son la muestra de elección para las tres especies implicadas en cuadros diarreicos. Se recomienda el cultivo directo en medio selectivo.

¿Cuánto tiempo sobrevive Campylobacter en refrigeración si la siembra se retrasa?

Campylobacter es viable de 1 a 3 semanas a temperaturas de refrigeración. Si la siembra no es inmediata, se pueden usar medios de transporte como Cary-Blair.

¿A qué temperatura y durante cuánto tiempo se incuban los cultivos de Campylobacter?

Aunque crece a 37 ºC, su temperatura óptima es 42 ºC, durante 48 a 72 horas.