Fundamentos de Microbiología: Técnicas de Siembra, Cultivo e Identificación

1. Siembra en medio semisólido

La técnica adecuada es: D) Picadura.

2. Identificación de hongos filamentosos

Describe la siguiente imagen, destacando tipo de tinción, microorganismo y partes que podemos diferenciar:

Sobre la imagen se observa un Aspergillus flavus. Se utiliza la tinción azul de lactofenol para hongos filamentosos, los cuales forman hifas tabicadas ramificadas que producen cabezas conidiales cuando se exponen al aire. Cada cabeza conidial se compone de un conidióforo con una vesícula terminal, la cual porta capas de fiálides o esterigmas. Las fiálides alargadas generan columnas de conidias esféricas que constituyen los propágulos infecciosos a partir de los cuales se desarrolla la fase micelial del hongo.

3. Técnicas de siembra en placa

Según la siguiente fotografía, podemos afirmar que se está realizando una siembra: D) Siembra en 3 giros.

4. Identificación de siembra masiva

Según la siguiente fotografía, podemos afirmar que se está realizando una siembra: A) Siembra masiva.

5. Sospecha diagnóstica

Según la imagen, podemos sospechar de: C) Candida albicans.

6. Morfología bacteriana y tinción

Describe la siguiente imagen, destacando forma, disposición y tipos de tinción:

Son bacterias Streptococcus Gram positivas. Utilizamos la tinción de Gram y presentan una disposición en cadena.

7. Siembra en tubo

¿Cómo debería sembrarse el siguiente tubo? A. Picadura + simple estría.

8. Temperatura de incubación

¿A qué temperatura deberían incubarse las bacterias psicrófilas? La temperatura óptima para las bacterias psicrófilas es de 25 °C o menos.

9. Detección de portadores de Staphylococcus aureus

Para determinar la prevalencia de portadores de S. aureus en clase, se recomienda el siguiente protocolo:

• Medios de cultivo recomendados: Agar Manitol Salado (AMS). Este medio selectivo y diferencial es comúnmente utilizado para el aislamiento de S. aureus. Contiene manitol como fuente de carbono y un indicador de pH. Las colonias de S. aureus fermentan el manitol, produciendo ácido y virando el medio a color amarillo.
• Origen de la muestra: Muestras nasales. Dado que S. aureus es comúnmente portado en la nariz, se deben tomar hisopos nasales.
• Procedimiento:
  1. Recopilación: Utiliza hisopos estériles para recoger muestras de la mucosa nasal.
  2. Siembra: Inocula las placas de Agar Manitol Salado mediante técnicas asépticas.
  3. Incubación: Incuba a 37 °C durante 24-48 horas.
  4. Observación: Las colonias que fermentan el manitol se vuelven amarillas.
  5. Confirmación: Realiza tinción de Gram y pruebas bioquímicas adicionales.

Nota: Algunos portadores son asintomáticos. Este método permite identificar específicamente a los fermentadores de manitol.

10. Realización de un antibiograma

El antibiograma es el estudio de la sensibilidad de un microorganismo a uno o varios antimicrobianos. La técnica más rápida y económica es la prueba de sensibilidad por difusión en discos:

1. Preparación: Prepara una suspensión bacteriana tocando 2 o 3 colonias aisladas y emulsionándolas en 5 mL de solución salina hasta alcanzar una turbidez de 0,5 McFarland.
2. Homogeneización: Agita la suspensión con el Vortex antes de medir la turbidez.
3. Inoculación: Realiza una siembra masiva en la placa con un hisopo, eliminando el exceso de líquido.
4. Aplicación: Coloca los discos impregnados de antibiótico sobre el agar usando pinzas estériles (flamear las pinzas entre cada disco).
5. Incubación: Incuba la placa en posición invertida durante 24 horas a 37 °C.

Esta técnica es de carácter cualitativo.