Guía completa del procesamiento de tejidos y técnicas de tinción en histología

Procesamiento de Tejidos para Microscopía Óptica

Pasos:

1. Fijación: Formalina, desnaturalización del tejido + Bouin da mejor aspecto.
2. Deshidratación: Quitar agua ir agregando alcohol de 50 a 100.
3. Aclaramiento: Se utiliza xileno, esto ayuda a la visualización.
4. Inclusión: Parafina.
   ü Distinguir células superpuestas entre sí en un tejido y la matriz extracelular.
5. Sección: Corte con micrótomo.
6. Montaje: Se coloca en el portaobjetos.
7. Tinción:
   ü Colorantes hidrosolubles que permiten diferenciar los diferentes componentes celulares.
   Eliminar la parafina - Rehidratar - Tinción - Deshidratación.
   - Cubreobjetos - Montaje.

Colorantes y Reacciones Histológicas Comunes

• Colorantes que diferencian los componentes ácidos y básicos de la célula: Tinción Hematoxilina y Eosina.
• Colorantes especializados que distinguen los componentes fibrosos de la matriz extracelular.
• Sales metálicas que se precipitan en los tejidos y forman depósitos de sales en ellos.

Tinción Hematoxilina (H) y Eosina (E):

Hematoxilina (H):

• Base.
• Tiñe de color azul los componentes ácidos de la célula.
• Núcleo, Ribosomas, Matriz de Cartílago. (Basófilos)

Eosina (E):

• Ácido.
• Tiñe de rosado los componentes básicos de la célula.
• Citoplasma, Fibras de Colágeno. (Acidófilos)

Técnicas de Imágenes Digitales:

• Se emplea una computadora para capturar y manipular imágenes histológicas:
• Observación inmediata de la imagen adquirida.
• Modificación digital de la imagen.
• Capacidad para realizar la imagen mediante el uso de programas de computadora disponibles en el comercio.

Procedimientos Avanzados de Observación:

Histoquímica:

Método de tinción que proporciona información sobre la presencia y localización de macromoléculas intracelulares y extracelulares.

Inmunocitoquímica:

Se utilizan anticuerpos marcados con fluoresceína y antianticuerpos para identificar una localización intracelular y extracelular de las macromoléculas.

Autorradiografía:

Método en el que se incorporan isótopos radiactivos en macromoléculas, que a continuación se observan con el uso de una película de emulsión superpuesta.

Microscopía Electrónica:

El uso de electrones como fuente de luz permite lograr una ampliación y resolución mayores. (150.000 veces)
Imágenes Tridimensionales.