Procesamiento de tejidos y técnicas de tinción en histología

Resumen

El documento describe los pasos del procesamiento de tejidos para microscopía óptica, desde la fijación hasta el montaje, y explica la tinción con hematoxilina y eosina. También recoge técnicas avanzadas de observación como la histoquímica, la inmunocitoquímica, la autorradiografía y la microscopía electrónica, junto con el uso de imágenes digitales en histología.

Puntos clave

El procesamiento incluye fijación, deshidratación, aclaramiento con xileno, inclusión en parafina, sección con micrótomo, montaje y tinción.
La hematoxilina es un colorante básico que tiñe de azul los componentes ácidos, como el núcleo y los ribosomas.
La eosina es un colorante ácido que tiñe de rosado los componentes básicos, como el citoplasma y las fibras de colágeno.
La histoquímica informa sobre la presencia y localización de macromoléculas intracelulares y extracelulares.
La inmunocitoquímica usa anticuerpos marcados para localizar macromoléculas dentro y fuera de la célula.
La microscopía electrónica usa electrones como fuente de iluminación y alcanza una ampliación de unas 150.000 veces.

Ponte a prueba

Procesamiento de Tejidos para Microscopía Óptica

Pasos:

Fijación: Formalina, desnaturalización del tejido + Bouin da mejor aspecto.
Deshidratación: Quitar agua ir agregando alcohol de 50 a 100.
Aclaramiento: Se utiliza xileno, esto ayuda a la visualización.
Inclusión: Parafina.
ü Distinguir células superpuestas entre sí en un tejido y la matriz extracelular.
Sección: Corte con micrótomo.
Montaje: Se coloca en el portaobjetos.
Tinción:
ü Colorantes hidrosolubles que permiten diferenciar los diferentes componentes celulares.
Eliminar la parafina - Rehidratar - Tinción - Deshidratación.
- Cubreobjetos - Montaje.

Colorantes y Reacciones Histológicas Comunes

Colorantes que diferencian los componentes ácidos y básicos de la célula: Tinción Hematoxilina y Eosina.
Colorantes especializados que distinguen los componentes fibrosos de la matriz extracelular.
Sales metálicas que se precipitan en los tejidos y forman depósitos de sales en ellos.

Tinción Hematoxilina (H) y Eosina (E):

Hematoxilina (H):

Base.
Tiñe de color azul los componentes ácidos de la célula.
Núcleo, Ribosomas, Matriz de Cartílago. (Basófilos)

Eosina (E):

Ácido.
Tiñe de rosado los componentes básicos de la célula.
Citoplasma, Fibras de Colágeno. (Acidófilos)

Técnicas de Imágenes Digitales:

Se emplea una computadora para capturar y manipular imágenes histológicas:
Observación inmediata de la imagen adquirida.
Modificación digital de la imagen.
Capacidad para realizar la imagen mediante el uso de programas de computadora disponibles en el comercio.

Procedimientos Avanzados de Observación:

Histoquímica:

Método de tinción que proporciona información sobre la presencia y localización de macromoléculas intracelulares y extracelulares.

Inmunocitoquímica:

Se utilizan anticuerpos marcados con fluoresceína y antianticuerpos para identificar una localización intracelular y extracelular de las macromoléculas.

Autorradiografía:

Método en el que se incorporan isótopos radiactivos en macromoléculas, que a continuación se observan con el uso de una película de emulsión superpuesta.

Microscopía Electrónica:

El uso de electrones como fuente de luz permite lograr una ampliación y resolución mayores. (150.000 veces)
Imágenes Tridimensionales.

Preguntas frecuentes

¿Qué pasos siguen al procesamiento de tejidos para microscopía óptica?

Los pasos son fijación, deshidratación, aclaramiento con xileno, inclusión en parafina, sección con micrótomo, montaje en portaobjetos y tinción. Después de la tinción se elimina la parafina, se rehidrata, se deshidrata de nuevo y se coloca el cubreobjetos.

¿Qué tiñe la hematoxilina y qué tiñe la eosina?

La hematoxilina, que es básica, tiñe de azul los componentes ácidos como el núcleo y los ribosomas. La eosina, que es ácida, tiñe de rosado los componentes básicos como el citoplasma y las fibras de colágeno.

¿Para qué sirve la autorradiografía?

Sirve para incorporar isótopos radiactivos en macromoléculas y observarlas con una película de emulsión superpuesta.