Replicación en eucariotas y procariotas, código genético degenerado y vectores de clonación
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Diferencia entre eucariotas y procariotas en replicación
A continuación se describen las principales diferencias en la replicación del ADN entre eucariotas y procariotas:
- Sitio de inicio: En procariotas existe normalmente un único origen de replicación, llamado OriC. En eucariotas hay una gran cantidad de orígenes de replicación distribuidos a lo largo de los cromosomas.
- Dirección y velocidad de replicación: En eucariotas la replicación del ADN ocurre de manera lineal y suele ser más lenta debido a la mayor complejidad del proceso y del empaquetamiento de la cromatina. En procariotas la replicación es más rápida y ocurre en general de manera circular, dado que el cromosoma procariota suele ser circular.
- Telomerasa y cromosomas lineales: En eucariotas existe un sistema relacionado con los telómeros y la telomerasa, la cual añade repeticiones de nucleótidos al extremo 3' de las hebras para compensar el acortamiento durante la replicación. La actividad de la telomerasa es alta en células germinales y en muchas células cancerígenas; en procariotas esto no ocurre porque sus cromosomas suelen ser circulares y no presentan telómeros lineales.
Código genético degenerado
Código genético degenerado: El código genético es prácticamente universal y degenerado, lo que significa que más de un codón (triplete) puede codificar el mismo aminoácido. Existen 64 tripletes en total, de los cuales 61 codifican aminoácidos para los 20 aminoácidos proteicos; los otros 3 son codones de terminación (stop).
Plásmido Ti y clonación en plantas
Para clonar en plantas, el plásmido Ti de la bacteria Agrobacterium tumefaciens ha resultado ser un vector de gran utilidad.
Vectores: clonación, expresión y transformación
A continuación se definen y corrigen los conceptos relacionados con distintos tipos de vectores:
- Vector de clonación: Es una molécula de ADN capaz de autorreplicarse. Es la molécula que se inserta en la célula hospedadora y que se incorpora de manera covalente al fragmento de ADN que se desea clonar.
- Vector de expresión: Plásmido o fago que contiene regiones promotoras con la capacidad de permitir la expresión de las secuencias clonadas del ADN en la célula hospedadora.
- Vector de transformación: Plásmido con información esencial para replicarse, transferirse y posibilitar la expresión de genes foráneos en el genoma de la célula vegetal.
Diferencias entre un vector de clonación y un vector de expresión
Las principales diferencias funcionales son:
- Vector de clonación: Su función principal es la multiplicación y la conservación de un gen en las células derivadas de la célula hospedadora inicial. Está diseñado para permitir el almacenamiento y la obtención de múltiples copias del inserto.
- Vector de expresión: Además de permitir clonar genes, su objetivo principal es conseguir la expresión de los genes insertados, es decir, la producción de ARN y proteínas funcionales en la célula hospedadora.
Elementos esenciales en vectores
Los vectores de clonación y de expresión contienen elementos específicos que facilitan su función:
- Vectores de clonación:
- Varios sitios de restricción (polylinker) reconocidos por endonucleasas para insertar el ADN.
- Marcadores genéticos (por ejemplo, resistencia a antibióticos) que permiten diferenciar las células que han incorporado el vector de las que no.
- Un origen de replicación (ori) que permite la replicación por la ADN polimerasa de la célula hospedadora.
- Vectores de expresión:
- Además de los elementos anteriores, incluyen un promotor específico que permite la transcripción por la ARN polimerasa del hospedador y otros elementos reguladores necesarios para la expresión eficiente del gen introducido; por ejemplo
Nota: Se han corregido errores ortográficos y gramaticales, ajustado mayúsculas y minúsculas, y estructurado el contenido para mayor claridad sin eliminar información del texto original.