Técnica de extensión y frotis de sangre periférica: procedimiento y zonas
Resumen
El texto explica qué es una extensión o frotis de sangre periférica y cómo se obtiene la muestra, por venopunción con anticoagulante EDTA o por punción capilar del dedo. Describe paso a paso la técnica del portaobjetos en cuña y las tres zonas del frotis: cabeza, cuerpo y cola. Con ello el estudiante aprende a preparar una extensión y a identificar la zona ideal para el estudio morfológico.
Puntos clave
- Un frotis de sangre periférica es una capa fina de sangre sobre un portaobjetos para el estudio morfológico de las células.
- La muestra se obtiene por venopunción (anticoagulada con EDTA) o por punción capilar de la yema del dedo con lanceta.
- La técnica habitual es la del portaobjetos en cuña, con un ángulo de 35-45º entre el soporte y el extensor.
- Se deposita una gota de sangre de unos 3 mm de diámetro (10-15 µL) y la monocapa ocupa entre 2/3 y 3/4 del portaobjetos.
- La cabeza es la zona más gruesa, con varias capas de hematíes y más linfocitos.
- El cuerpo, con una sola capa de hematíes y proporción equilibrada de leucocitos, es la zona ideal para el estudio morfológico.
- La cola es la zona más fina, con hematíes acordonados, más granulocitos y monocitos grandes y plaquetas grandes.
Introducción al Frotis de Sangre Periférica
Una extensión o frotis de sangre periférica consiste en una capa fina de sangre dispuesta sobre un portaobjetos para realizar un estudio morfológico de las células con ayuda de un microscopio y, a menudo, de tinciones.
Métodos de Obtención de la Muestra
La sangre que se usa en la extensión se puede obtener por dos vías:
- Por venopunción: En este caso se debe anticoagular con EDTA.
- Por punción de la yema del dedo con una lanceta: Se obtiene sangre capilar.
Procedimiento de la Extensión Sanguínea
La extensión sanguínea se realiza recubriendo parcialmente un portaobjetos con una gota de sangre de manera que las células se dispongan dando lugar a una monocapa uniforme. El procedimiento de obtención más habitual es mediante la técnica de portaobjetos en cuña.
Para la preparación manual de una extensión sanguínea mediante la técnica de portaobjetos en cuña se necesitan dos portaobjetos de vidrio limpios de 7,5 x 2,5 cm, preferentemente de alta calidad y que tengan los bordes biselados. Uno de ellos se utiliza como soporte y el otro como extensor.
Pasos para Realizar la Extensión
La extensión se realiza de la siguiente manera:
- Depositar una gota de sangre de aproximadamente 3 mm de diámetro (10-15 µL) en el portaobjetos soporte, cerca de los extremos.
- Deslizar el portaobjetos extensor un poco hacia atrás para que su borde entre en contacto con la gota de sangre. De esta forma, la sangre se distribuye por capilaridad a lo largo del extremo del portaobjetos extensor.
- Colocar el portaobjetos extensor sobre el soporte, por delante de la gota de sangre, formando una cuña en un ángulo de 35-45º entre ambos y aplicando una presión homogénea. De esta manera, la gota de sangre se extiende uniformemente formando una monocapa de células que ocupa aproximadamente entre 2/3 y 3/4 de la longitud del portaobjetos soporte.
- Dejar secar la extensión al aire.
Zonas de la Extensión Sanguínea
En las extensiones se distinguen tres zonas diferenciadas:
1. Cabeza
Es la zona inicial más gruesa. Los hematíes pueden estar formando más de una capa y existe una mayor proporción de linfocitos.
2. Cuerpo
Es la zona media del frotis. Los hematíes se disponen formando una sola capa y los leucocitos mantienen una proporción equilibrada; es la zona ideal para realizar el estudio morfológico de las células.
3. Cola
Es la zona final de la extensión, la más fina. Los hematíes se disponen de forma acordonada dejando huecos entre ellos y hay una mayor proporción de leucocitos grandes (granulocitos y monocitos) y plaquetas grandes. La cola termina en forma ligeramente redondeada con un borde finamente deshilachado (denominado barbas).
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PDF Word HTMLPreguntas frecuentes
¿Cuál es la zona ideal para estudiar un frotis de sangre periférica?
La zona ideal es el cuerpo, la zona media del frotis, donde los hematíes forman una sola capa y los leucocitos mantienen una proporción equilibrada.
¿Qué anticoagulante se usa cuando la sangre se obtiene por venopunción?
Cuando la sangre se obtiene por venopunción debe anticoagularse con EDTA.
¿Qué ángulo se forma entre los portaobjetos en la técnica en cuña?
El portaobjetos extensor se coloca formando una cuña con el soporte en un ángulo de 35-45º, aplicando una presión homogénea.
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