Teoría de la cormatografía

Picos con cola:sale soluto de la columna durante un tiempo excesivo después de la elución del maximo del pico. Se produce cuando KD disminuye al aumentar la concentración deel (en concentraciones bajas prefiere la fase estacionaria y se retrasa respecto al maximo). Causas: cuando los lugares activos de la f.estacionaria tiene diferente actividad. los más activoes retienen fuertemente a las primera porciones de soluto y cuadno el maximo de concentracion de soluto ya ha pasado se resisten a desorberse. En RP-HPLC se producen colas cuando har silanoles residuales desprotonados que retiene los solutos cationicos. Se evita añadiendo un acido debil a la f,mobil

picos con avanzadilla:comienza a eluir soluto mucho antes de producirse la elución del maximo. KB aumenta con la concentracion de soluto(el soluto en concentraciones bajas prefiere la fase movil y se adelante respecto al maximo). Causado por la sobrecarga de la columna.

Inconv:picos mal resueltos,tiempos de retencion dependientes de la concentracion de soluto, dificultad para medur la linia base,tiem`pos de retencion dependientes de la concentracion.

Criterio 5s:se supone que las oscilaciones son aleatorias por lo que siguen la distribución de gauss. El 99%del area bajo la curva de gauss esta comprendiada entre -2,5s y 2,5s, por lo que se tiene un valor de anchura de la linia de fondo de 5s.Esta medida es suficiente precisa para calcular LOD y comparar unos metodos por otros.

Caracteristicas de un detector para cromatografia:.pca deriva de la señal y bajo ruido,alta sensibilidad frente a los solutos,respuesta rapida,amplio rango dinamico lineal,bajo volumen muerto,baja sensibilidad frente a cambios de T o composicion de la fase mobil.facil manejo,robustez y fiabilidad,preferentemente no destructivo.

elucion zonal:la muestra se introduce toda de una vez,procurando que ocupe una zona estrecha al rpincipio del sistema separador se eluye con flujo continuo de fase mobil,los solutos aparecen en forma de picos.elucion frontal:la muestra se  introduce en el sistema de forma continua constituyendo ella misma la fase movil,se retiene uno o algunos componentes que eluyen cuando se alcanza su saturacion o se cambia el eluyente.elucion por desplazamiento: la muestra se introduce de una vez ocuoando una franja estrecha, el disolvente desplaza a todos los componentes ya que es retenido fuertemente.