Sondas y técnicas de hibridación in situ (FISH) en citogenética

Resumen

Este documento describe los tipos de sondas usadas en la hibridación in situ (FISH) en citogenética. Distingue las sondas de secuencia repetida, como las centroméricas, las teloméricas y las de pintado cromosómico, de las de secuencia única o locus específico. Recoge también las técnicas de alta resolución, como M-FISH y SKY, y la FISH cuantitativa. El estudiante aprenderá para qué sirve cada tipo de sonda.

Puntos clave

Las sondas centroméricas (CEP) marcan toda la región centromérica y detectan alteraciones numéricas en metafases y en núcleos en interfase.
Las sondas teloméricas (TEL) se dirigen a las regiones subteloméricas p y q, y sirven para detectar deleciones y translocaciones.
Las sondas de pintado cromosómico (WCP) hibridan con todo el cromosoma y son útiles cuando los cromosomas son de mala calidad.
Las sondas de secuencia única marcan una región genómica concreta y permiten descartar translocaciones crípticas o microdeleciones.
M-FISH y SKY permiten visualizar cada par cromosómico de un color diferente y son muy útiles en cariotipos complejos.
La FISH cuantitativa (Q-FISH) mide telómeros, cuyo estudio se correlaciona con enfermedades degenerativas, cáncer y envejecimiento.

Ponte a prueba

Tipos de Sondas Aplicadas en Hibridación In Situ (FISH)

Sondas de Secuencia Repetida

Sondas Centroméricas (CEP): Marcan toda la región centromérica. Permiten detectar alteraciones cromosómicas numéricas tanto sobre metafases como sobre núcleos en interfase. Se puede valorar la presencia o ausencia de alteraciones numéricas sin la necesidad de tener células en división.
Sondas Teloméricas (TEL): Específicas para regiones subteloméricas p y q de cada cromosoma. Para deleciones y translocaciones ligadas a retraso mental y anomalías congénitas.
Sondas de Pintado Cromosómico (WCP): Formadas por una batería de sondas que en su conjunto hibridan con todo el cromosoma. Permiten visualizar alteraciones citogenéticas numéricas y estructurales sobre metafases y confirmar cariotipos con translocaciones complejas con cromosomas marcadores. De gran utilidad cuando los cromosomas son de mala calidad y la citogenética convencional no puede resolver el cariotipo.

Sondas de Secuencia Única (Locus Específico)

Marcan regiones cromosómicas muy concretas. Hibridan con el ADN de una región genómica concreta.

Es posible detectar alteraciones numéricas y estructurales tanto en metafases como en núcleos interfásicos. De gran utilidad para descartar alteraciones cromosómicas difíciles de identificar con técnicas de bandeo convencionales, como translocaciones crípticas o microdeleciones.

Nuevas Técnicas de Hibridación In Situ (FISH)

Con la intención de resolver las carencias de las sondas convencionales y aportar una mayor información en el cariotipo.

Técnicas de Alta Resolución

Hibridación Genómica Comparada (HGC):
Multicolor-FISH (M-FISH) y Spectral Karyotyping (SKY): Permiten visualizar simultáneamente cada par cromosómico de un color diferente. Muy útiles para determinar de forma inequívoca cariotipos complejos y cromosomas no identificables con técnicas de bandeo.
Multibanding-FISH: Similar a las de M-FISH o SKY, permite la generación de un patrón de bandas de distintos colores para cada cromosoma.

Técnicas Cuantitativas

FISH Cuantitativa (Q-FISH): Permite medir telómeros, cuyo estudio se correlaciona con el desarrollo de algunas enfermedades degenerativas, cáncer, envejecimiento, etc. Con esta técnica podría establecerse la edad biológica de un individuo y llevar a cabo comparaciones con su edad cronológica.

Preguntas frecuentes

¿Para qué sirve la hibridación in situ (FISH) en citogenética?

Es una técnica que permite detectar alteraciones cromosómicas numéricas y estructurales, y resolver cariotipos que la citogenética convencional no puede identificar.

¿Para qué sirven las sondas centroméricas?

Marcan toda la región centromérica y permiten detectar alteraciones numéricas sin necesidad de células en división, tanto en metafases como en núcleos en interfase.

¿Cuándo se usan las sondas de pintado cromosómico?

Se usan cuando los cromosomas son de mala calidad y la citogenética convencional no puede resolver el cariotipo. Permiten confirmar cariotipos con translocaciones complejas con cromosomas marcadores.