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Transducción, Multiplicación Viral y Cálculo de Densidad Celular en Microbiología: Temas 13 y 15 con Problemas Resueltos

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FINAL TEMA 13

Proceso de transducción

En el proceso de transducción, se forma la cápside y van introduciéndose en su interior fragmentos del ADN vírico y fragmentos del ADN bacteriano. Entonces se lisa la célula y los fagos infectan nuevas células. Si lleva fragmento bacteriano, puede integrarse en la nueva célula teniendo un ADN mixto. Si no se integra, se degrada.

Proceso de transducción especializada

Debida a un error durante el ciclo lisogénico. El virus transfiere solo porciones específicas del genoma bacteriano. Durante el ciclo lisogénico, el bacteriófago inyecta su genoma en la bacteria y se integra en el genoma bacteriano, convirtiéndose en un profago. Si ocurre un entrecruzamiento, se libera el profago con una porción del ADN bacteriano. Este profago liberado podrá comenzar un ciclo lítico.

Como resultado, tenemos que el ADN vírico se encapsida, lisa la bacteria, se liberan los fagos y estos podrán infectar a otras bacterias.

Multiplicación de virus animales

  • Fase I (Adsorción): Colisión al azar de los viriones con la célula; se une a proteínas de membrana que actúan como receptores.
  • Fase II (Penetración y desnudamiento): Penetración directa del virus; penetración de virus envueltos mediante fusión con la membrana plasmática; penetración de virus con envuelta mediante endocitosis.
  • Fase III (Replicación y transcripción): Varía dependiendo del virus; existe un ciclo diferente para cada virus.
  • Fase IV (Síntesis y ensamblaje de cápsides víricas).
  • Fase V (Liberación de viriones): En virus desnudos, mediante lisis de la célula. En virus envueltos, mediante gemación, en la que el virus adquiere la membrana.

Virus virulentos

Inhiben la síntesis de ADN, ARN y proteínas de la célula hospedadora, aunque el ADN no suele degradarse.

Virus no virulentos

Pueden estimular la síntesis de macromoléculas de la célula hospedadora.

EFECTOS CITOPÁTICOS

  1. Inhibición de la síntesis de ADN, ARN y proteínas del hospedador.
  2. Daño de lisosomas celulares, que provoca la liberación de enzimas hidrolíticas y destrucción celular.
  3. Alteración de la membrana plasmática mediante la inserción de proteínas específicas del virus.
  4. Formación de cuerpos de inclusión.
  5. Alteraciones cromosómicas.
  6. Transformación de la célula en célula tumoral.

PROBLEMAS

Problema 3

Partimos de un inóculo que tiene una concentración celular de 107 cél/mL. ¿Qué volumen de este inóculo hemos de añadir a un frasco con 200 mL de medio de cultivo para dejar en este una densidad celular de 102 células/mL?

Resolución:

  1. Primero tenemos que saber cuántas células totales tenemos en 200 mL.
  2. Regla de tres: si 1 mL → 102 células, en 200 mL → x. Por tanto, x = 2 × 104 células/mL que queremos en el frasco de 200 mL.
  3. Otra regla de tres: si 1 mL → 107 células, en x mL → 2 × 104 células.

Así, x son los mL de inóculo de 107 que tenemos que coger para que en 200 mL haya 2 × 104 células.

Problema 4

Para estimar el número de células viables de una muestra microbiana se han preparado 4 diluciones decimales (1/10, 1/100, 1/1000 y 1/10000). A partir de cada una de estas diluciones se han sembrado por extensión 0,1 mL en placas de Petri con medio de cultivo adecuado. En la placa que procede de la dilución 1/10000 aparecen 75 UFC. ¿Cuál es el número de células viables en la muestra inicial? Exprese el resultado en células/mL.

Respuesta: 75 × 10 × 104 = 7,5 × 106 células/mL.

Problema 5

Para estimar el número de células totales en una muestra microbiana se han preparado tres diluciones decimales de la misma (1/10, 1/100, 1/1000). A partir de la dilución 1/1000 se carga una cámara de recuento de Thoma. Al microscopio se cuentan 250 células en los 16 cuadrados en los que está dividida la cámara. ¿Cuál es el número de células totales en la muestra inicial?

Resolución:

  • 250 células en 0,1 mm3.
  • 250 × 10 = células en 1 mm3.
  • 250 × 10 × 103 = células en 1 cm3.
  • 250 × 10 × 103 × 103 = células de la muestra inicial.

FÓRMULA

n = (log Nt2 − log Nt1) / log 2, K = n / t

Donde N = nº de generaciones, Nt1 = nº de células en el tiempo t1.

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