Piruvato translocasa
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1. Buf H: proteger estruct mito.
Agua dest: lisa eritrocitos. Ac. Ascórbico: dona e-=C+
Buf R: proteger función + ambiente.
Azul oxi → mito respira = pasan e- → Transpa.
Malonato: inhibidor II= bloquea e- =azul no se reduce. Sucinato: Oxidado por Suci Deshidrogen (II)=se reduce.
2. Sucinato→Fumarato y transfiere e- a ubiquinona(Q
SDH heterotrimérica: SDHA FAD / SDHB transfiere e- / SDHC+SDHD fija II a m. Mito. Inter.
Cancers por acumulacº Sucinato.
SDH inhibida competitvo: Malonato y Oxoloacetato / no competitivo: Carboxina, TTFA y ROS.
Ác. Succinico: evita desnaturalizar en trituracº.
Ác. Tricloroacético: destruir enzima +detener.
Aceite: aísla oxígeno del aire= anaerobio evita reoxidación. Permite transparente.
5. 1/Vmax parte y. -1/Km parte x.
Fosfatasa alcalina: colorimétrico+ hidrólisis fosfoester
Fosfato potásico= inhibidor enzima.
p-NFP incoloro → hidrolisis→ Amarillo.
Tampón Tris-HCL: pH óptimo y V constante.
3. Mito participan metabolismo Krebs y Calcio + señalizacº redox con ROS + apoptosis.
M ext: bicapa lipídica permeable iones peques. M. Int: selectiva + transportadoras + invaginacº= crestas complejos fosforilacº. Matriz mito: enzimas Krebs
I: NADH deshidrogenasa. 2 e- NADH → ubiquinona.
II: Suci Deshidroge. E- Sucinato→Ubiquinona. No H+
III: Citocromo bc1. ½ e- Sucinato→Citocromo C.
IV: Citocromo oxidasa. E- → O2 → H2O.
Activa mito= Sucinato y Piruvato. Inhibe= Malonato y Cianuro. Amarillo→recibe e- →Violeta (↑ actividad)
+ Sucinato = no tienen dnd sacar e- = Amarillo
Malonato compite con Sucinato Deshidro= bloquea e- = no se reduce pq depende de II. Diluciones.
4. Interferir fosfo oxidativa por: FCCP (disipa gradiente H+) y Azida (bloquea e- del IV).
MTT=Amarillo → reducida por Sucinato Deshidro → Formazano=Azul (↑ A = ↑ actividad mito).
Glucosa: ↑ respiracº y actividad. MTT: captor e-.
Etanol: No fermentable = aerobio= ↑ e- = Azul.
Azida: inhibidor IV / bloquea cadena respiratoria.
FCCP: activada respiracº desacoplada= elimina gradiente H+= ↑ e-. MES: buffer pH.