Electroforesis en geles de poliacrilamida (SDS-PAGE): protocolo y reactivos
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Reactivos para la práctica 5: Electroforesis en geles discontinuos de poliacrilamida en presencia de SDS
- Acrilamida 40%
- Metilen-bis-acrilamida 2%
- SDS
- TEMED
- Persulfato amónico
- Tris
- Glicina
- HCl
- Metanol
- Ácido acético
- Azul Coomassie
- 2-β-mercaptoetanol
- Azul de bromofenol
- Hielo
Procedimiento
Limpieza de los cristales
Limpiar los cristales con agua abundante y después con etanol y acetona para eliminar restos de grasa.Montaje de los cristales
Montar los cristales en el sistema de electroforesis.Preparación del gel separador
Se preparan 30 ml de volumen final de un gel al 12% de acrilamida/bisacrilamida.- Verter la mezcla entre los dos vidrios hasta una altura de 2,5 cm desde el borde superior, dejando un pequeño volumen en el vaso de precipitado para comprobar